De analyse van tuberculose door bloed bij kinderen en volwassenen

Symptomen

Een gevaarlijke infectieziekte vereist niet alleen tijdige diagnose, maar ook periodieke monitoring van de behandelresultaten. Voor tuberculose worden bloedtesten als informatieve methoden beschouwd. Welke onderzoeksmethoden worden gebruikt, hoe verschillen ze? In de herziening van methoden voor het controleren van bloedparameters, kunt u leren over de kenmerken van analyse, informativiteit, snelheid van het verkrijgen van resultaten.

Wat is tuberculose?

Ernstige infectieziekte komt voor in een chronische vorm. Tuberculose wordt veroorzaakt door bacteriën - Koch's toverstaf (Mycobacterium tuberculosis-complex), die resistent zijn tegen externe invloeden. De karakteristieke kenmerken van deze ziekte zijn:

  • ademhalingsorganen worden aangetast - longvorm;
  • aangetaste gewrichten, botten, lymfeklieren, urinewegen - extrapulmonale verschijning;
  • infectie komt vaak voor door druppeltjes in de lucht, minder vaak contact, via voedsel, van moeder tot foetus via de placenta.

Bij tuberculose worden open en gesloten vormen van ontwikkeling onderscheiden. In het eerste geval is de patiënt besmettelijk, gevaarlijk voor anderen, is het een drager en excreta-bacterie. Hij wordt behandeld in speciale klinieken. In de gesloten vorm lijkt de ziekte op een koude, gevaarlijke microben die niet in het milieu worden vrijgegeven. Voor infectie wordt gekenmerkt door het optreden van dergelijke symptomen:

  • depressieve stemming;
  • relaxen in de avond;
  • lichte koorts;
  • overmatig zweten 's nachts;
  • gezwollen lymfeklieren;
  • eetluststoornissen;
  • rusteloze slaap;
  • zwakte;
  • hoesten;
  • gewichtsverlies;
  • tachycardie.

Men gelooft dat mensen die lijden aan slechte sociale en levensomstandigheden, met een lage levensstandaard, lijden aan tuberculose. Artsen geloven dat de belangrijkste factor bij het verschijnen van een infectie een afname van de immuniteit is. De tuberkelbacil, die het lichaam binnendringt, kan daar lang blijven, en activeert na een scherpe daling in de afweer van het lichaam. De provocerende oorzaken van de ontwikkeling van pathologie zijn vaak:

  • stressvolle situaties;
  • zwangerschap;
  • ondervoeding;
  • chronische ziekten;
  • alcoholmisbruik;
  • HIV-infectie;
  • drugsverslaving;
  • roken.

Bloedonderzoek voor tuberculose

De primaire methoden voor het diagnosticeren van een infectie zijn de Mantoux-test, die wordt uitgevoerd in de kindertijd, en fluorografie voor volwassenen. Een bloedtest op tuberculose wordt als nauwkeuriger en informatief beschouwd. Deze techniek heeft de voordelen:

  • geen contra-indicaties;
  • de diagnose wordt in korte tijd gesteld;
  • het is niet nodig om herhaalde onderzoeken uit te voeren;
  • valse positieven zijn uitgesloten;
  • vervangt de Mantoux-test bij een kind met verbodsbepalingen voor de uitvoering ervan.

Welke tests nodig zijn om de patiënt met een vermoedelijke tuberculose-infectie door te laten, beslist de arts gezien het klinische beeld. Er zijn verschillende soorten onderzoeken die worden gebruikt in verschillende stadia van de ziekte. Een van de allereerste en verplichte methoden:

  • volledig bloedbeeld - bepaalt de aanwezigheid in het lichaam van het ontstekingsproces;
  • biochemisch onderzoek - door de eiwitten in de bloedstructuur te veranderen, wordt de vorm en het stadium van de ziekte onthuld.

Om de diagnose van tuberculose te verduidelijken, voert u extra soorten bloedonderzoek uit. Artsen schrijven aan patiënten voor:

  • PCR - polymerasekettingreactie - is informatief, geeft voor een korte tijd een volledig beeld van de ontwikkeling van de ziekte, wordt gebruikt in het geval van extrapulmonaire infectie, voor vroege diagnose, controlebehandeling.
  • ELISA - enzyme-linked immunosorbent assay - bepaalt het gehalte aan specifieke antilichamen in het bloed voor het infectieuze agens - de Koch-plank.
  • T-SPOT is een moderne onderzoeksmethode, gebruikt voor HIV-infectie, gekenmerkt door nauwkeurigheid.

Wanneer het nodig is om de analyse te doen

Kinderen lopen het risico tuberculose te ontwikkelen. Naast het feit dat hun immuunsysteem niet volledig is gevormd, kan de ziekte alle lichaamsfuncties nadelig beïnvloeden. Bloedonderzoeken voor tuberculose worden uitgevoerd:

  • kinderen in contact met zieke mensen;
  • baby's met gemengde resultaten na de Mantoux-test;
  • Burgers die aan het werk gaan in medische, educatieve instellingen voor kinderen (kleuterscholen, scholen).

Indicaties voor de studie is contact met de drager van de ziekte. Om bloed te doneren voor tuberculose is vereist van diegenen die in de horeca willen werken. Analyses worden voorgeschreven voor vermoedelijke pathologische processen of ter bevestiging van tuberculose-infectie, wanneer een patiënt heeft opgemerkt:

  • black-out op de foto met fluorografie, radiografie;
  • temperatuurstijging in de avond;
  • gewichtsvermindering;
  • chronische hoest;
  • nachtelijk zweten;
  • ernstige zwakte;
  • gebrek aan eetlust;
  • rusteloze slaap met nachtmerries.

Voltooi bloedbeeld voor tuberculose

Er zijn geen speciale markers die helpen bij het identificeren van deze infectieziekte. Een bloedtest voor tuberculose onthult de aanwezigheid van ontsteking en pathologische processen in bepaalde stadia. Houd er bij het decoderen rekening mee dat in het geval van ontwikkeling:

  • infiltratie (het beginstadium van de ziekte) - ESR stijgt (erythrocytensedimentatiesnelheid), leukocyten veranderen weinig;
  • verspreide vorm (brede verspreiding) - zie een significante verslechtering van de prestaties;
  • processtilte - de resultaten worden normaal.

Het volledige bloedbeeld wordt in het laboratorium uitgevoerd. De patiënt maakt het omheiningsbiomateriaal voor de bestudering van de vinger. De resultaten zijn binnen een paar uur klaar. Het nadeel van deze techniek is dat je geen nauwkeurige diagnose kunt stellen. Belangrijke indicatoren bij het decoderen van de resultaten:

  • ESR bij tuberculose - 80 mm / uur, wat wijst op een actief ontstekingsproces. De normale waarde voor vrouwen is 20 mm / uur, voor mannen - 15;
  • het aantal leukocyten - markeer het overschot (de norm is 4-9 x10 bij 9 graden / l);
  • het aantal lymfocyten nam af;
  • het aantal eosinofielen nam toe tot 8% (de norm voor volwassenen is 0-5).

Bij het ontcijferen van de algemene analyse van tuberculose in het bloed de aandacht vestigen op de afwijking van de standaard van rode bloedcellen. Deze indicator is afhankelijk van de aard van de ziekte:

  • met trage vorm, puntlokalisatie van de laesie, is het aantal normaal, maar hun kleur verandert, het niveau van hemoglobine in de erytrocyte neemt af;
  • met significante infiltratie neemt de afmeting van de rode bloedcellen en hun aantal af.

biochemische

Bij het uitvoeren van dit onderzoek wordt bloed uit een ader genomen, het resultaat wordt de volgende dag verkregen. Met een goede decodering van indicatoren is het mogelijk om ernstige ziekten in een vroeg stadium te identificeren. Helaas biedt een biochemische bloedtest voor tuberculose geen nauwkeurige diagnose. Het onderzoek heeft de volgende doelen:

  • periodieke monitoring van het behandelingsproces;
  • correctie van aandoeningen van homeostase (zorgen voor de stabiliteit van de interne omgeving van het lichaam);
  • het identificeren van de effecten van medicijnen, bijwerkingen.

Bij tuberculose zijn biochemische bloedparameters afhankelijk van het stadium van de ziekte, complicaties en bijkomende pathologieën. Bij het ontcijferen van de analyse opgemerkt:

  • met een inactieve vorm van infectie zijn de totale proteïnen, serumproteïnefracties normaal;
  • in het acute verloop van de ziekte, wanneer de chronische vorm van tuberculose-infectie begint te vorderen, neemt de albumine-globuline-verhouding af (de norm is 15, -2,3).

Biochemisch onderzoek tijdens de ontwikkeling van een bacteriële infectie helpt bij het volgen van de toestand van de lever en de nieren. Om de gezondheidstoestand van de patiënt te beoordelen, met name in het geval van een ernstige vorm van de ziekte, let op dergelijke bloedparameters bij tuberculose:

  • direct en totaal bilirubine (onder normaal);
  • AST - aspartaat-aminotransferase (verhoogd);
  • ALT - alanine-aminotransferase (stijgt).

Met deze methode bepalen studies snel de aanwezigheid in het bloed van specifieke antilichamen tegen de veroorzaker van tuberculose - de toverstok van Koch. ELISA - enzymimmunoassay - gebruikt als alternatief voor de Mantoux-test. Resultaten zijn binnen twee uur klaar. Bij het uitvoeren van onderzoek in het laboratorium:

  • de patiënt neemt bloed uit een ader;
  • Het biomateriaal wordt behandeld met een speciale oplossing;
  • wachten op de vorming van een binding tussen het antigeen en het antilichaam;
  • met een positief resultaat wordt de enzymreactie geregistreerd.

Het ontbreken van ELISA-analyse - bij gebrek aan nauwkeurigheid van 100%, het onvermogen om het stadium van de ziekte te bepalen. Het verkrijgen van vals-positieve en fout-negatieve resultaten is mogelijk. Gedetecteerde antilichamen tegen tuberculose duiden niet altijd op de ziekte. Een negatief resultaat is niet noodzakelijk de afwezigheid van een infectie. Amg-immunoglobuline wordt niet gedetecteerd in het onderzoek in het geval van:

  • het eerste stadium van infectie, wanneer het nog niet in voldoende hoeveelheid is ontwikkeld;
  • de aanwezigheid van de immunodeficiëntie van de patiënt.

Een positief resultaat is de aanwezigheid van tuberculose bij immunoglobulinetesten Amg. Dit kan wijzen op dergelijke processen in het lichaam:

  • een actieve vorm van de ziekte die niet wijdverspreid is, werd gevonden;
  • immunoglobulinen verschenen als gevolg van de recente vaccinatie van een kind tegen tuberculose of een ziekte (vals-positief);
  • er zijn significante verschuivingen in de behandeling;
  • de patiënt heeft tuberculose.

PCR-diagnostiek

De methode van polymerasekettingreactie (PCR) artsen voorschrijven, als er een aanname over de diagnose is en het nodig is om het te bevestigen. In deze analyse wordt het biomateriaal niet alleen bloed, sputum, urine, hersenvocht, uitstrijkjes van de geslachtsorganen en de keelholte onderzocht. De voordelen van deze techniek:

  • hoge nauwkeurigheid;
  • diagnose van de ziekte gedurende de dag;
  • nauwkeurige detectie van de bron van infectie in de extrapulmonale vorm;
  • identificatie van de ziekteverwekker, zelfs één molecule in een vroeg stadium van de ziekte;
  • de juiste keuze van behandelmethoden;
  • monitoring van de resultaten van therapie.

Er zijn geen contra-indicaties voor deze studie. Het wordt gebruikt voor de diagnose van infecties bij kinderen, zwangere vrouwen. Het ontbreken van PCR-diagnostiek in zijn complexiteit. Vereist hooggekwalificeerde specialisten in het laboratorium. Het onderzoek is op deze manier uitgevoerd:

  • bloedmonsters afnemen uit een ader;
  • geplaatst in een kolf met een speciale substantie die het proces van stolling stopt;
  • cellen worden geïsoleerd uit plasma;
  • met behulp van de polymerasereactie wordt DNA van het pathogeen geïsoleerd;
  • zelfs de aanwezigheid van meerdere Koch-sticks is een bewijs van een infectieus proces.

T-spot analyse

Dit is een van de modernste, uiterst nauwkeurige methoden voor het diagnosticeren van tuberculose. Voor het uitvoeren van een onderzoek wordt bloed uit een ader genomen, de reactie van het immuunsysteem op de aanwezigheid van micro-organismen wordt gedetecteerd. Tuberculosebacteriën bevatten specifieke antigenen. Immuniteit reageert daarop - er is een activatie van lymfocytcellen, waarvan de aanwezigheid in het onderzoek is vastgesteld. T-SPOT.TV is de internationale naam van de methode, die staat voor:

  • T - immuuncellen;
  • SPOT - vlek;
  • TV - de aanduiding van tuberculose.

Tijdens het onderzoek worden vlekken die op de plaats van antigeen-specifieke immuuncellen worden gevormd geteld. De analyse onthult alle vormen van de ziekte. Het nadeel van een dergelijke studie is dat de actieve fase van de infectie niet kan worden onderscheiden van de latente (latente). De positieve aspecten van het uitvoeren van de T-SPOT-techniek:

  • hoge nauwkeurigheid;
  • gebrek aan contra-indicaties;
  • de mogelijkheid van onderzoek bij mensen met allergieën, pathologieën die het immuunsysteem beïnvloeden (diabetes, HIV-infectie);
  • geen vals positieve resultaten;
  • binnen een half uur totalen krijgen.

Bloedonderzoek voor tuberculose aan kind

In de kindertijd wordt een tuberculinetest (Mantoux) uitgevoerd om tuberculose te detecteren met het oog op preventie. Als er een positief resultaat is, benoem dan aanvullend onderzoek. In de complexe diagnose van infectieziekten met behulp van een complete bloedtelling. Decryptie wordt gedaan volgens dezelfde principes als volwassenen. Indicatoren zijn afhankelijk van de leeftijd, deze waarden duiden op ontsteking:

  • ESR - toename (normaal 4-10 mm / uur);
  • leukocyten - een toename (meer dan 4-8,8 x10 tot 9 graden / l);
  • hemoglobine wordt verlaagd;
  • het aantal neutrofielen (onvolgroeide leukocyten) is groter dan 6%.

In het geval van een allergische reactie op Mantus wordt een alternatief, modern, zeer gevoelig bloedonderzoek voor tuberculose bij kinderen uitgevoerd - QuantiFERON-TB Gold7. Bepaal met behulp van de hulp de activiteit van het infectieuze proces en identificeer de latente vorm van de ziekte. Een van de effectieve methoden voor diagnostisch testen van tuberculose in het bloed van kinderen:

  • enzymgekoppelde immunosorbenttest - detecteert antilichamen tegen bacteriën die de infectie veroorzaakten;
  • polymerase kettingreactie - met hoge nauwkeurigheid bepaalt de Koch tubercle bacilli door de aanwezigheid van hun DNA in het bloed.

Antilichamen tegen tuberculose: de voordelen en essentie van de diagnosemethode

Een nieuwe diagnostische methode is gebaseerd op de studie van bloed tegen antilichamen tegen tuberculose. Het bepalen van de aanwezigheid van antilichamen, het instellen van hun aantal en klasse stelt artsen in staat om een ​​accurate diagnose te stellen, op tijd om de behandeling te starten. De waarde van de methode wordt erkend door kinderartsen.

Antilichamen tegen tuberculose in het bloed

Antistoffen tegen de veroorzaker van gevaarlijke pathologie, die in de moderne wereld populair is geworden, tuberculose zijn specifieke immunoglobulinen. Al bij naam kun je raden welk systeem verantwoordelijk is voor hun productie - het immuunsysteem. De studie naar de aanwezigheid van antilichamen wordt ELISA genoemd. Vaak is in handboeken de afkorting te vinden - ELISA. Voor antilichaamtests wordt een bloedtest uit een ader genomen.

Wanneer tuberculose de actieve fase van de kuur ingaat, begint de vorming van antilichamen tegen antigenen:

Antistoffen beginnen zich bijna onmiddellijk na het begin van actief gedrag in het bloed van mycobacteriën in het bloed te vormen. De ELISA geeft nauwkeurige gegevens over de etiologie van de ziekte, bepaalt het stadium waarin het zich bevindt.

Antilichaamtest voor tuberculose

Een antilichaamtest kan niet worden vergeleken met een routinetest, het is een complexe diagnostische procedure waarvoor speciale training van zowel de patiënt als de arts vereist is. Het niveau en de snelheid van het proces van het binden van immuuncellen met antigenen van tuberculosepathogenen wordt gecontroleerd. Heeft al het onderzoek uitgevoerd met behulp van het enzym. De procedure maakt het mogelijk om een ​​complex van heterogene informatie te verkrijgen over de gezondheidstoestand van de patiënt, de kwaliteit van zijn immuniteit.

Een bloedtest wordt van de patiënt afgenomen wanneer hij gedurende een bepaalde periode geen voedsel heeft ingenomen, bij voorkeur 12 uur, maar de minimale hoeveelheid is 1 uur. Daarom voorgeschreven tests voor de ochtend. En de patiënt kan niet alleen niet eten, medicijnen en vloeistoffen gebruiken is verboden. Elke penetratie in het bloed verandert het beeld van de pathologie en kan valse resultaten geven. De drugscursus wordt een week voor het onderzoek stopgezet. Directe ELISA-technologie is vergelijkbaar met biochemische analyse.

Mycobacterium tuberculosis

De bron van infectie is mensen die worden getroffen door tuberculose. Mycobacteriën zitten in sputum. Het komt uit het lichaam bij hoesten, niezen, spugen. De eerste laesie ontwikkelt zich en eindigt met het verschijnen van tekenen van tuberculose bij 10% van de geïnfecteerden. In de overige 90% begint de immuunafweer helder te werken, actief en voorkomt het pathologie. Infectie tijdens deze periode vindt plaats in een latente (verborgen) vorm, mycobacteriën vermenigvuldigen zich niet.

Antistoffen tegen Mycobacterium tuberculosis worden door verschillende laboratoriumonderzoeken ontdekt en stellen u in staat om tijdig met de behandeling te beginnen. Meer dan 70 soorten mycobacteriën, 5 daarvan veroorzaken gevaarlijke pathologie. Ze zijn verenigd in een tuberculosecomplex:

  • menselijk type;
  • bull;
  • Afrikaans;
  • muis;
  • vaccinstam.

Het menselijke type veroorzaakt de meerderheid van de vormen en soorten tuberculose. Volgens verschillende bronnen varieert het cijfer van 85 tot 92%. Runder wordt de oorzaak van 5 tot 15% van de gevallen. De Afrikaanse soort veroorzaakt de meerderheid van de gevallen in het Zuid-Afrikaanse continent, ongeveer 90%. Muis wordt zelden gediagnosticeerd. Vaccinstam helpt te voorkomen. Meestal treft de ziekte verschillende organen en systemen van het menselijk lichaam:

De resterende percentages worden verdeeld over dergelijke systemen:

Extrapulmonaire soorten komen vaker voor bij patiënten met een HIV-infectie.

Bloedonderzoek voor antilichamen tegen tuberculose

Microscopisch onderzoek uitgevoerd op sputum wordt als standaard beschouwd. De methode heeft voordelen, het belangrijkste is hoge specificiteit en nadelen. Het grootste nadeel is een lage gevoeligheid, om niet te worden aangezien, moet er een speciaal aantal bacteriën zijn in het zaaien, hoge concentratie. Efficiëntie verschilt per categorie. De laagste tarieven geven:

  • leeftijd van patiënten ouder dan 60;
  • kinderen;
  • HIV-geïnfecteerd.

Sputumonderzoek duurt lang, en dat wil vaak niet verliezen. Bacteriën groeien in sputumkweek gedurende maximaal 8 weken. Gedurende deze tijd is het mogelijk om het therapeutische complex van een ongecompliceerd type pathologie met een bekend pathogeen te voltooien. Naast microscopisch zijn er nog twee soorten diagnostiek:

Beide soorten worden gebruikt om longlesies te identificeren.

Differentiële screeningstechniek maakt het mogelijk om de aanwezigheid van antilichamen tegen mycobacteria tuberculosis te detecteren. Hoge resultaten worden bereikt door specifieke antigenen voor analyse te nemen. Om een ​​vals resultaat te krijgen in deze studie is onmogelijk. De gevoeligheid van de testanalyse:

  • lymfeklieren - 61%;
  • exsudatieve pleuritis - tot 100%.

Het doel en de doelstellingen van de analyse voor antilichamen tegen mycobacterium tuberculosis:

  1. Controleer de effectiviteit en correctheid van de behandeling.
  2. Detectie van de aanwezigheid van een infectie.
  3. Bevestiging van een vooraf vastgestelde diagnose.

Wanneer de ELISA de enige juiste keuze van de diagnostische methode wordt:

  1. Langdurig (constant) contact met de geïnfecteerde.
  2. Beroepsactiviteiten bij patiënten met tuberculose.
  3. Communiceren met mensen die risico lopen. Niet-effectieve langetermijnbehandeling van pathologieën van chronische soorten (prostatitis, cystitis, pyelonephritis).
  4. Bloedarmoede.
  5. Leukocytose.

Symptomen van pathologie wijzen op de noodzaak om medisch advies in te winnen:

  • zwakte en snelle vermoeidheid door stress;
  • temperatuur op het niveau van subfebrile;
  • verhoogde zweten 's nachts;
  • hoest die meer dan 2-3 weken aanhoudt;
  • pijn in het borstbeen;
  • krampen achterin;
  • pijn in de gewrichten en peritoneum.

Totaal antilichamen tegen tuberculosepathogenen

Testen op het gehalte aan antilichamen tegen tuberculose bestaat uit het bepalen van het totale aantal van bepaalde klassen van Lg-formaties:

De onderzoeksmethode maakt deel uit van een reeks diagnostische maatregelen die in staat zijn om de veroorzaker van tuberculose, mycobacteriën, te detecteren in de vroege stadia van infectie.

Als gevolg hiervan worden twee totalen verkregen:

Het positieve antwoord is verdeeld in bepaalde groepen:

  • lokalisatie van de actieve vorm van pathologie;
  • totale antilichamen na de ziekte;
  • TB-infectie.

Het resultaat laat zien dat de behandeling effectief is wanneer de hoeveelheid antilichamen sterk wordt verhoogd, boven de norm.

De test helpt de arts om zijn diagnose te bepalen, terwijl noch röntgenfoto's noch microscopie een juist antwoord gaven, PCR toonde pathologische vaagheid en de symptomen zijn vergelijkbaar met longtuberculose.

Bloedonderzoek voor antilichamen tegen tuberculose bij kinderen

Kinderen zijn bang om met een vinger een bloedtest te doen, de meesten huilen en vallen in hysterie. Bloed uit een ader is een nog complexer onderzoeksproces. Daarom schrijven artsen de IFA in bepaalde gevallen alleen voor aan kinderen. Wat is de indicatie voor verificatie:

  • vermoede ontwikkeling van longtuberculose;
  • bij twijfel over de diagnose van longletsels;
  • dringende noodzaak om de bron van infectie te vinden;
  • bij manifestatie van symptomen van de terugkerende verschijnselen.

De methode helpt om volledige controle te houden over het verloop van de pathologie en de effectiviteit van het geselecteerde therapeutische complex van tuberculose-maatregelen.

De reactie van het antigeen met het antilichaam geeft het exacte cijfer van de hoeveelheid immunoglobuline, zodat u kunt bepalen welke immuniteit de baby heeft. Diagnostiek wordt verwerkt met behulp van conventionele wiskundige berekeningen. Welke infecties worden er in het lichaam van het kind gevonden:

  • HIV;
  • virale hepatitis;
  • chlamydiale infecties;
  • herpetische pathologie;
  • mycobacteriën;
  • tuberculose.

De stadia van de ziekte hebben een verschillende klasse van antilichamen, dus de specialist bepaalt de periode voor de ontwikkeling van de ziekte.

Bloed voor antilichamen tegen tuberculose in plaats van Mantus

De Mantoux-test is niet de enige onderzoeksmethode waarmee de infectie kan worden opgespoord. Er zijn ook andere mogelijkheden. Dit is een speciale bloedtest. Drie analysemethoden:

  1. Over het algemeen. Het wordt niet alleen met vermoedelijke tuberculose uitgevoerd. Elke pathologie die binnendringt in het lichaam, leidt tot veranderingen in het bloed. Het kan worden beschouwd als een algemene analyse van het startpunt van onderzoek. De ziekte is gevonden, verdere opheldering van de kenmerken ervan is vereist. De methode vult het onderzoek aan en is geen alternatief.
  2. Immunoassay (ELISA). De studie heeft tot doel de aanwezigheid van antilichamen tegen bacteriën die tuberculose veroorzaken te detecteren. Kortom, het is de aanwezigheid van immunoglobulinen in het bloed. De voordelen van de techniek zijn in hoge gevoeligheid voor alle elementen van het bloed en de nauwkeurigheid van het resultaat. Vaak schrijven artsen een ELISA voor wanneer Mantoux een positief resultaat laat zien.
  3. Polymerase kettingreactie (PCR). De studie onthult de aanwezigheid van niet-antilichamen en pathogenen. Stelt het aantal mycobacteriën in.

Speciale analyses van het bloedgehalte worden gedaan in plaats van Mantoux, omdat het handiger, sneller en optimaal nauwkeurige resultaten oplevert.

Bloeddiagnose is een betrouwbare manier om de aanwezigheid van mycobacteriën in de bloedvaten te detecteren. De ELISA-methode is snel, waardoor de tijdsperiode om de oorzaken van de ziekte te identificeren kan worden verkort. Vooral voor kinderen is de tijd erg belangrijk. Hoe eerder het kind de nodige behandeling krijgt, hoe makkelijker en sneller het herstel zal zijn.

Mycobacterium tuberculosis-analyse en interpretatie

Tuberculose is een van de gevaarlijkste en meest voorkomende infectieziekten in onze tijd. De bron van tuberculose is mycobacterium (Mycobactrium tuberculosis) - de zogenaamde Koch-bacillus. Veel soorten diagnostiek zijn gebaseerd op detectie. Hoe MBT wordt aangetroffen bij tuberculose, hoe infectie te voorkomen, en wat voor soort bacteriën het is, en iedereen zou het moeten weten.

Typen laboratoriumdiagnostiek

In de moderne geneeskunde zijn er verschillende manieren om laboratoriumdiagnostiek van tuberculose te vinden. De meest voorkomende en effectieve zijn:

  • weefselkleur van biologische vloeistoffen volgens Zil-Nilsson met microscopisch onderzoek van het materiaal;
  • serologische methoden;
  • polymerasekettingreactie (PCR);
  • bacteriologisch zaaien.

Ook wordt voor de screeningsdiagnose van tuberculose bij kinderen en in sommige gevallen bij volwassenen de tuberculinetest van Mantoux gebruikt.

Tissue-Nielson-weefselkleur wordt gebruikt om MBT in het sputum van de patiënt te detecteren. Voor de betrouwbaarheid van de analyse is het noodzakelijk om sputum goed te verzamelen in een speciale container. Vervolgens wordt het verzamelde materiaal aangebracht op laboratoriumglas en behandeld met Nilson's Fuchsin-oplossing. Daarna worden de overblijfselen weggewassen en wordt het histologische materiaal behandeld met zwavelzuur voor bleken.

Aan het einde wordt het uitstrijkje gekleurd met methyleenblauwoplossing. Alleen zuurbestendige micro-organismen zijn ongevoelig voor. Deze methode is niet van toepassing in de vroege stadia van de ziekte, omdat door het kleine aantal mycobacteriën in het sputum het resultaat vals-negatief zal zijn. Ook is deze methode niet van toepassing in gesloten en extrapulmonaire vormen van tuberculose.

De serologische methode is gebaseerd op de detectie van specifieke antilichamen tegen mycobacteriën in het bloed. Dit komt door de immuunrespons van het lichaam op vreemd weefsel. Wanneer Koch's stokken het lichaam binnenkomen, probeert het immuunsysteem onmiddellijk het buitenaardse object te vernietigen. Immunoglobulinen worden geproduceerd die de bacterie aanvallen.

Afhankelijk van het tijdstip van infectie, worden verschillende immunoglobulinen in het bloed aangetroffen. Binnen 2-3 weken na het begin van de ziekte wordt IgM in het bloed gedetecteerd. Ze geven recente infecties aan. Dan zijn er IgA en IgG, die praten over het actieve beloop van de ziekte en de lange duur ervan gedurende vele maanden.

Klasse G Immunoglobuline

Deze onderzoeksmethode is zeer gevoelig en kan MBT detecteren, zelfs met gesloten tuberculose. Deze diagnostische optie maakt het niet alleen mogelijk om de ziekte te detecteren, maar ook om het stadium van zijn ontwikkeling te bepalen, zonder te wachten op uitgesproken klinische symptomen.

Polymerase-kettingreactie is een redelijk nauwkeurige manier om onderzoek te doen naar de detectie van tuberculose-infecties. Het gebruik ervan stelt u in staat om de infectie in de beginfasen te identificeren. Dankzij PCR is het als gevolg van de ontwikkeling van moleculaire genetica mogelijk bacteriële DNA- of RNA-deeltjes in het bloed van de patiënt en andere biologische vloeistoffen te detecteren.

Deze diagnostische methode onthult antibioticaresistente stammen.

Vaak is de diagnose van extrapulmonale tuberculose moeilijk vanwege de gelijkenis van symptomen met andere ziekten. Tuberculose van de nieren, blaas, prostaat wordt herhaaldelijk verward met pyelonefritis, prostatitis, cystitis en andere ziekten.

Met behulp van PCR wordt een urine-analyse uitgevoerd op mycobacterium tuberculosis om laesies van deze aandoening van het urinogenitale systeem te detecteren. Een snelle leveringsprocedure en een eenvoudige onderzoekstechnologie weerleggen of bevestigen de tuberculose van de relevante autoriteiten met een nauwkeurigheid van maximaal 90%.

Bacterioscopische methode verwijst naar zeer gevoelige onderzoeken. Het omvat het planten van het materiaal dat bestudeerd wordt op verschillende voedingsmedia. In de aanwezigheid van de tuberkelbacillus groeien na enige tijd kolonies bacteriën op deze media. Het is door deze methode dat de keuze van het antibioticum plaatsvindt.

Het materiaal wordt gezaaid op media met een antibioticum en er wordt waargenomen aan welk van hen de groei van de bacteriën stopt. Het nadeel van deze methode is dat het bij de studie van sputum onmogelijk is extrapulmonale tuberculose of de gesloten vorm ervan te detecteren.

De groei van mycobacteriën op voedingsmedia

  • De tuberculinetest van Mantoux is gericht op het identificeren van de immuunrespons op het tuberculoseantigeen dat in het lichaam wordt geïntroduceerd.
  • Mycobacterium tuberculosis, DNA-bepaling (Mycobacterium tuberculosis, DNA) in serum

    Bepaling van DNA van pathogenen van tuberculose, mycobacterieel complex: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. africanum in serum door de methode van polymerasekettingreactie (PCR) met detectie in "real time".

    Tuberculose (van het Latijn Tuberculum - tuberkel) - een veel voorkomende, sociaal afhankelijke menselijke ziekte. Ze zijn ziek en beesten. Het veroorzakende agens van tuberculose werd ontdekt door R. Koch in 1882. Dit zijn zuurbestendige aerobe bacteriën (74 soorten) van het geslacht Mycobacterium, wijd verspreid in grond, water en bij dieren. Bij mensen is de meest voorkomende pathogeen Mycobacterium tuberculosis. De tweede meest voorkomende is Mycobacterium bovis. Beide soorten zijn zeer resistent tegen vele omgevingsfactoren, en in het lichaam blijven ze levensvatbaar gedurende een zeer lange tijd en kunnen ze vele jaren na infectie een ziekte veroorzaken. Het is erg belangrijk dat mycobacterium tuberculosis zogenaamde L-vormen kan vormen. Als ze in het lichaam blijven, creëren ze een immuniteit tegen tuberculose.

    Langdurig kan tuberculose latent optreden en kan het door toeval worden ontdekt, hoewel symptomen zoals zwakte, vermoeidheid, lichte koorts, nachtelijk zweten en bloedarmoede en leukopenie zich vaak manifesteren. Momenteel, ondanks alle prestaties van antimicrobiële therapie, bedreigt tuberculose de toekomst van de natie. Daarom zijn alle diagnostische methoden, vooral de latente vormen ervan, uiterst belangrijk.

    Er zijn veel methoden voor laboratoriumdiagnostiek van tuberculose: uitstrijkmicroscopie (meestal gebruikt voor dit doel sputum), de klassieke kweekmethode, ELISA. Ze hebben allemaal voordelen, maar ook bepaalde nadelen, met name de detectie van mycobacteriën alleen in het geval van een voldoende aantal ervan.

    In de afgelopen jaren is polymerasekettingreactie (PCR) gebruikt voor diagnose. De hoge gevoeligheid maakt het mogelijk om afzonderlijke cellen en zelfs DNA-fragmenten in het onderzochte materiaal te detecteren. De methode elimineert kruisreacties en de specificiteit bereikt 100%. PCR maakt differentiatie mogelijk van beperkte en verspreide vormen van tuberculose, vooral bij kinderen, zelfs met negatieve resultaten van microbiologische studies.

    • detecteerbare fragmentspecifieke delen van mycobacterieel DNA;
    • bepalingsspecificiteit - 100%;
    • De detectiegevoeligheid is 100 kopieën van mycobacterieel DNA in een monster.

    literatuur

    1. Makarevich A.E. Luchtwegaandoeningen - M. Higher School, 2000. - 368 p.
    2. Jacobs D. et al. Laboratorium test handboek / Lexi-Comp./2002 - pp. 828 - 829.
    • Koorts die wordt gekenmerkt door dagelijkse dubbele stijging en daling van de lichaamstemperatuur. Tegen de achtergrond van tuberculine overgevoeligheid of tuberculine-anergie.
    • Acute ontstekingsziekten van de bovenste en onderste luchtwegen met langdurig contact met een tuberculeuze patiënt in de geschiedenis.
    • Abnormale reactie op een tuberculinatie (overgevoeligheid of anergie) tegen de achtergrond van exacerbatie van een systemische ziekte.
    • Vermoedelijke systemische lupus erythematosus.

    Interpretatie van onderzoeksresultaten bevat informatie voor de behandelende arts en is geen diagnose. De informatie in dit gedeelte kan niet worden gebruikt voor zelfdiagnose en zelfbehandeling. Een nauwkeurige diagnose wordt gesteld door de arts, waarbij zowel de resultaten van dit onderzoek als de nodige informatie uit andere bronnen worden gebruikt: anamnese, resultaten van andere onderzoeken, enz.

    Testkwaliteit. Het resultaat wordt gegeven in termen van "gedetecteerd" of "niet gedetecteerd".

    • "Gedetecteerd": Mycobacterium-specifieke DNA-fragmenten specifiek voor mycobacteriën werden gevonden in het te analyseren monster;
    • "Niet gedetecteerd": in het geanalyseerde monster werden mycobacterium-specifieke DNA-fragmenten of de concentratie van het pathogeen in het monster niet onder de gevoeligheidsgrens van de test gevonden.
    Houd er rekening mee dat de timing van PCR-onderzoeken kan worden verhoogd bij het uitvoeren van confirmerende tests.

    Bloedonderzoek voor tuberculose: waar te passeren? Wat zijn de tests voor tuberculose?

    Er zijn ziekten nauwkeurige diagnose, die alleen mogelijk is na laboratoriumonderzoek. In de beginfase zijn de symptomen niet uitgesproken en lijken ze op andere ziekten. Daarom moeten al diegenen die langdurig hoesten, een onredelijke temperatuurstijging en nauwe contacten met de besmette dieren, worden getest op tuberculose. Laboratoriumonderzoek kan worden gedaan in de ambulante op de plaats van verblijf of rechtstreeks in de TB-apotheek.

    Bloedonderzoek voor tuberculose

    Voor een nauwkeurige diagnose van het verloop van de ziekte zijn er tests die het niveau van productie van gamma-interferon in het lichaam bepalen:

    Diagnostische tests onderscheiden zich door een hoge mate van nauwkeurigheid (meer dan 90%), zelfs bij gevaccineerden. Een bloedtest op tuberculose heeft zijn voordelen, namelijk:

    • Eenmalige analyse;
    • Bepaalt de aanwezigheid van mycobacteriën in twijfelgevallen;
    • Geen behoefte aan herhaalde bezoeken aan diagnostische laboratoria.

    De test wordt gebruikt in gevallen waar de Mantoux-reactie geen betrouwbare resultaten oplevert.

    Om de effectiviteit van de behandeling te bepalen met behulp van de polymerasereactie om het DNA van mycobacteriën (PCR) te bepalen. Dit is de meest accurate kwantitatieve en kwalitatieve methode voor het detecteren en beheersen van de behandeling van een ziekte. Indicaties voor PCR-onderzoeken:

    • Diagnose van tuberculose;
    • Bepaling van de mycobacteriële focus;
    • Herhaling testen;
    • De aanwezigheid van niet-longvormen.

    Na de diagnose wordt de PCR periodiek bepaald om de behandelingstactieken te corrigeren.

    Volledige bloedtelling voor tuberculose bepaalt de algemene toestand van het lichaam en de toetreding van geassocieerde ziekten. In de volgorde van standaard diagnostische onderzoeken bepalen de aanwezigheid van HIV-infectie en hepatitis.

    Waar kun je getest worden op tuberculose?

    Een patiënt die zich tot de behandelend arts heeft gericht over algemene malaise, zweten, hoesten, moet worden gescreend op tuberculose zonder falen. De therapeut zal je vertellen waar je moet worden getest op tuberculose? Indicaties voor aanvullende tests op mycobacteriën zijn als volgt:

    • Twijfelachtige Mantoux-reactie;
    • De aanwezigheid van laesies infiltratie in de longen;
    • Om een ​​baan te krijgen in medische instellingen, voorschoolse en schoolinstellingen, horecagelegenheden;
    • Bezoekers uit gebieden die niet succesvol zijn op epid-een situatie.

    In andere gevallen is bloeddonatie voor de bepaling van mycobacterium tuberculosis verplicht - de aanwezigheid van foci van longweefsel met profylactische fluorografie van de longen.

    Iedereen kan bloed doneren voor tuberculose in een gespecialiseerde medische faciliteit - tubdispanser. Alle privélaboratoria voeren een bloedtest uit om mycobacteriën te detecteren. Artsen geven de voorkeur aan de diagnose van de ziekte door de meest gevoelige PCR-methode.

    De Mantoux-test test de bereidheid van het lichaam voor een immuunrespons op mycobacteriën, en dubieuze aanwijzingen zijn een reden om een ​​patiënt door te verwijzen voor PCR-diagnostiek. Een bloedtest is een individuele definitie van de infectie van een organisme.

    Wat zijn de tests voor tuberculose?

    Als het röntgenfoto, ongeacht het klinische beeld, infiltratieve foci identificeert, zal de patiënt een lange reeks diagnostische onderzoeken ondergaan. Hun doel is om de aanwezigheid van myco-bacillen in het lichaam te bevestigen of te ontkrachten. De belangrijkste tests die moeten worden doorlopen voor de detectie van tuberculose:

    1. Bloedonderzoek - wordt bepaald door het niveau van leukocytose en ESR. De laatste indicator voor tuberculose overschrijdt significant de norm (meer dan 40 mm / uur).
    2. Detectie van antilichamen met behulp van enzymimmunoassays.
    3. Detectie van klasse G immunoglobulinen in serum is een type-specifiek mycobacillus antilichaam. De methode dient niet als reden voor de definitieve verklaring van de diagnose. In grote steden met een hoge bevolkingsdichtheid is de serologische methode geen indicator voor menselijke infecties.
    4. De Wereldorganisatie van Phthisiatricians is van mening dat de bepaling van mycobacteriën in sputum een ​​verplicht criterium voor verificatie is. Een positief wordt beschouwd als 5 of meer mycobacteriën in het genomen monster.
    5. Het is verplicht om de gevoeligheid van bacteriën voor antibiotica te bepalen, waardoor u het juiste behandelingsregime en de combinatie van antibacteriële geneesmiddelen kunt kiezen. Deze methode is niet snel, omdat het gebaseerd is op plantcultuur in kweekmedia. Het duurt meer dan twee weken. Tot nu toe wordt de patiënt behandeld volgens het standaardschema. Na ontvangst van de data-analyse kan de tactiek worden aangepast en een ander antibioticum worden geselecteerd.
    6. De Mantoux-reactie is een universele methode voor massale detectie van infectie met mycobacteriën, die op scholen wordt gebruikt. De methode is gebaseerd op de intradermale toediening van verzwakte bacillen. Positief is de toename van papels tot 5 mm of meer. Hyperreactie van de huid op de Mantoux-test is een reden voor verdere tests op tuberculose.

    Sinds de uitvinding van röntgenstralen is de methode van voorafgaande fluorografie de belangrijkste diagnostische methode geworden voor longziekten. X-ray - de belangrijkste manier om de lokalisatie van de pathologische focus te bepalen. Als het infiltraat zich bevindt in gebieden die moeilijk te diagnosticeren zijn met röntgen, is een tomografisch onderzoek noodzakelijk, waardoor het mogelijk is om duidelijke grenzen van de aangetaste weefsels te bepalen.

    Mantoux huidtest

    De tuberculinatie is de belangrijkste indicator van morbiditeit in landen met lage niveaus van tuberculose. Testen omvat de introductie van tuberculinesuspensie in het onderste derde deel van de binnenkant van de onderarm. Na 48 uur wordt het gebied gevormd door weefseloedeem gemeten. Hoe groter de papule, hoe waarschijnlijker het is dat de persoon is geïnfecteerd. Er wordt rekening gehouden met de omstandigheden en levensstijl van het onderwerp. Nauwkeurige diagnose van Mantoux is onmogelijk.

    Een vals-positieve reactie treedt op in gevallen van infectie met pathogene bacteriën die niet zijn geassocieerd met pathogenen van tuberculose of in gevallen van infectie als gevolg van vaccinatie met BCG. Vals negatieve resultaten komen voor bij kinderen, ouderen en met HIV geïnfecteerd.

    T-SPOT - Tuberculoseproeven

    Dit is een innovatieve, zeer gevoelige test die de menselijke immuunrespons op bacteriën meet. Als reactie op de introductie van pathogenen van tuberculose produceert het lichaam gamma-interferon (cytokines). In de praktijk gebeurt dit als volgt: een patiënt neemt bloed en er valt een speciaal reagens op, dat de aanwezigheid van cytokines in het lichaam detecteert. Resultaten zijn binnen 24 uur klaar. De test geeft geen vals-positieve resultaten, behalve voor HIV-geïnfecteerde patiënten.

    Serologische tests voor tuberculose

    Testen op tuberculose door het diagnosticeren van antilichamen in het bloed is erg moeilijk. Onbetrouwbare methode. Ze kunnen niet worden gebruikt om actieve vormen te diagnosticeren. In de meeste landen is deze methode niet van toepassing.

    Microscopie van sputummonsters voor mycobacteriën

    Speeksel, dat wordt uitgescheiden door mucosale epitheelcellen in de menselijke luchtwegen, is een viskeuze vloeistof. Sputum-microscopie is de primaire methode voor het opsporen van tuberculose in landen met een hoge prevalentie van tuberculosepatiënten.

    Het bestudeerde materiaal wordt door de patiënt verzameld. Meestal genomen tot monsters. Een deel van het sputum wordt op een glasplaatje (uitstrijkje) geplaatst. Na kleuring met speciale kleurstoffen wordt het mogelijk om mycobacteriën onder een microscoop visueel te detecteren.

    Sputum-microscopie is een betaalbare, goedkope en informatieve diagnostische methode. Resultaten worden binnen twee uur verkregen. De gevoeligheid van de methode is 60%, omdat niet alle patiënten voldoende hebben voor de bepaling, de concentratie van mycobacteriën in het sputum. Zeer lage concentratie in sputum bij patiënten met een gecombineerde pathologie van tuberculose en HIV-infectie.

    Ondanks de diversiteit aan onderzoeksmethoden, is de diagnose van tuberculose zeer moeilijk, vooral in ontwikkelingslanden die in slechte mate verkeren. Exacte methoden zijn niet beschikbaar vanwege de hoge kosten en het gebrek aan hooggekwalificeerd personeel. Dit leidt tot vertragingen in de behandeling en draagt ​​bij tot de verspreiding van de ziekte.

    Mycobacterium tuberculosis-bloed

    Het idee van PCR is gebaseerd op het feit dat het gen in vitro kan worden vermenigvuldigd, waardoor het aantal kopieën in de miljoenen keren toeneemt. Het mechanisme van PCR bestaat uit de synthese in vitro van korte nucleotidesequenties voor daaropvolgende analyse. Voor PCR zijn een paar oligonucleotiden (primers) complementair aan het te onderzoeken fragment en het DNA-polymerase-enzym nodig. Onder bepaalde omstandigheden kunnen primers homologe sequenties in gedenatureerd DNA herkennen, eraan binden en dienen als primers voor de enzymatische synthese van kopieën van het gebied van het gen dat wordt bestudeerd. Elke synthesecyclus verdubbelt het aantal kopieën van het doelwitfragment, d.w.z. de hoeveelheid product (amplificatie) in het PCR-proces neemt exponentieel toe. 25-35 reactiecycli geven voldoende amplificatio voor verder onderzoek, zelfs uit een enkel DNA-fragment. Binnen enkele uren, met behulp van PCR, kunnen meer dan 50 miljard identieke moleculen worden verkregen uit een enkel fragment van het DNA-molecuul. Het is dus mogelijk om het genetische materiaal dat aanwezig is in het te onderzoeken monster in minimale hoeveelheden te bestuderen.

    De PCR-methode maakt het theoretisch mogelijk om zelfs 1 kopie van het DNA in een monster te detecteren, dus niet met een gevoeligheidslimiet. Een ander voordeel van PCR is dat het niet alleen wordt gekenmerkt door absolute gevoeligheid, maar ook door absolute specificiteit. PCR geeft geen vals-positieve resultaten, op voorwaarde dat de methode correct wordt uitgevoerd.

    De PCR-methode is geen vervanging voor traditionele morfologische, biochemische of immunologische methoden, maar een essentiële en noodzakelijke toevoeging. De ervaring met de organisatie en werking van PCR-laboratoria in een aantal deskundige en sanitair-epidemiologische instellingen toont aan dat, ondanks de initiële kosten en overheadkosten, het medische en economische effect zo groot is dat het wetenschappelijk, methodologisch en educatief werk mogelijk maakt, waardoor het niveau van sanitaire en epidemiologische veiligheid in Rusland.

    Momenteel wordt nieuwe PCR-technologie, Real-Time PCR, geïntroduceerd in de praktische gezondheidszorg. Het belangrijkste kenmerk is de monitoring en kwantitatieve analyse van de accumulatie van PCR-producten en de automatische registratie en interpretatie van de verkregen resultaten. Real-time PCR vereist geen elektroforese, wat de vereisten voor het PCR-laboratorium vermindert.

    De voordelen van de PCR-methode (PCR)

    PCR (polymerasekettingreactie, PCR, polymerasekettingreactie) is een van de meest betrouwbare moleculaire diagnostische methoden (waarvan een gen of genfragment het doel van onderzoek is). Lees meer over de PCR-methode >>>.

    De belangrijkste voordelen van de PCR-methode:
    1. Directe bepaling van het DNA (RNA) van het pathogeen (in tegenstelling tot de PCR-methode levert het enzym immunoassay indirect bewijs van de aanwezigheid van een infectie).
    2. Hoge specificiteit.
    3. Hoge gevoeligheid. De werkwijze maakt het mogelijk om enkele kopieën van het DNA van bacteriële cellen of virussen, d.w.z. bepalen van de aanwezigheid van het pathogeen in de eerste dagen van infectie, hetgeen van bijzonder belang is in de praktijk van bloedtransfusie.
    4. Universaliteit van de procedure.
    5. Eenvoud en gemak van de analyse.
    6. Relatief kleine tijd besteed aan analyse.
    7. Matige en voortdurend dalende kosten.
    PCR (polymerasekettingreactie, PCR, polymerasekettingreactie) is een van de meest betrouwbare moleculaire diagnostische methoden (waarvan een gen of genfragment het doel van onderzoek is). Lees meer over de PCR-methode >>>.

    De belangrijkste voordelen van de PCR-methode:
    Directe bepaling van het DNA (RNA) van de ziekteverwekker (in tegenstelling tot de PCR-methode, verschaft de immunoassay van het enzym indirect bewijs van infectie).
    Hoge specificiteit.
    Hoge gevoeligheid. De werkwijze maakt het mogelijk om enkele kopieën van het DNA van bacteriële cellen of virussen, d.w.z. bepalen van de aanwezigheid van het pathogeen in de eerste dagen van infectie, hetgeen van bijzonder belang is in de praktijk van bloedtransfusie.
    Universaliteit van de procedure.
    Eenvoud en gemak van analyse.
    Relatief weinig tijd besteed aan de analyse.
    Matige en voortdurend dalende kosten.

    Real-time PCR

    Momenteel wordt nieuwe PCR-technologie, Real-Time PCR, geïntroduceerd in de praktische gezondheidszorg. Het belangrijkste kenmerk is de monitoring en kwantitatieve analyse van de accumulatie van PCR-producten en automatische registratie en interpretatie van de verkregen resultaten. Voor deze methode is geen elektroforese vereist, waardoor de vereisten voor een PCR-laboratorium worden verlaagd. Door besparingen in productieruimte, personeelsbeperking en de vraag naar kwantitatieve DNA / RNA-bepaling, is deze methode de afgelopen jaren met succes toegepast in grote sanitaire epidemie-, diagnose- en onderzoekscentra in ontwikkelde landen van de wereld, ter vervanging van PCR in het huidige ("klassieke") formaat.
    Realtime PCR gebruikt fluorescent gelabelde oligonucleotide probes om DNA te detecteren tijdens amplificatie. Realtime PCR maakt een volledige analyse van het monster binnen 20-60 minuten mogelijk en is theoretisch in staat om zelfs één DNA- of RNA-molecuul in een monster te detecteren.

    Hoe real-time PCR werkt met TaqMan-sondes
    Real-time PCR maakt gebruik van het TaqMan-systeem dat de PCR-kinetiek direct tijdens de amplificatie bestuurt met behulp van fluorescentieresonantie-uitdoving. Voor detectie worden een probe met een fluorofoor en een blusser die complementair is aan het middengedeelte van het geamplificeerde fragment gebruikt. Wanneer de fluorofoor en quencher worden gekoppeld aan de oligonucleotide probe, wordt slechts een minimale fluorescentie-emissie waargenomen. Tijdens het amplificatieproces, als gevolg van de 5'-exonuclease-activiteit van Taq-polymerase, gaat het fluorescerende label in oplossing, bevrijdt zichzelf van nabijheid van de quencher en genereert een fluorescent signaal, geamplificeerd in ware tijd in verhouding tot de accumulatie van amplificatie.

    PCR-laboratorium voor
    definitie van transgene organismen

    Vanwege zijn voordelen wordt de PCR-methode veel gebruikt voor het diagnosticeren van virale en bacteriële infecties, erfelijke en oncologische ziekten, voor HLA-typering, in de forensische geneeskunde, voor het bepalen van vaderschap en persoonlijke identificatie, in epidemiologie, in genetica, in biotechnologie (transgene dieren, planten, micro-organismen), op het gebied van certificatie van voedselgrondstoffen en voedsel.

    Het wijdverspreide gebruik van moleculair biologische methoden in de voedselindustrie is te danken aan de opkomst van nieuwe wetten in het systeem van de Russische wetgeving die moleculaire biologische analyse en identificatie van transgene inserts in het genoom van landbouwplanten en andere genetisch gemodificeerde organismen introduceren als een verplicht onderdeel van het certificeringsproces voor relevant voedsel en grondstoffen.

    Bloedonderzoek voor tuberculose: normen, decodering, hoe te passeren

    Volgens specialisten worden jaarlijks ongeveer 8 miljoen mensen ziek met tuberculose. En onder de bevolking van de Russische Federatie blijft de incidentie van tuberculose nog steeds hoog. Gelukkig wordt de ziekte zelfs in de vroege stadia goed gediagnosticeerd. Onlangs zijn moderne diagnostische werkwijzen steeds populairder geworden, in het bijzonder bloedtesten op tuberculose.

    Methoden voor de diagnose van tuberculose

    Tuberculose is een chronische infectieziekte veroorzaakt door mycobacterium tuberculosis. De ziekte wordt overgedragen door druppeltjes in de lucht. Het risico op infectie neemt aanzienlijk toe met verminderde immuniteit bij mensen met chronische slopende ziekten en onder ongunstige leefomstandigheden.

    De longen worden meestal aangetast en longtuberculose is de meest voorkomende vorm van de ziekte. Mycobacteriën kunnen echter van invloed zijn op de inwendige organen (urogenitale en spijsverteringsorganen, hersenen en ruggenmerg), huid, gewrichten, lymfeklieren.

    Gezien de hoge incidentie van tuberculose hebben specialisten programma's ontwikkeld en geïmplementeerd om de ziekte te identificeren. Alle diagnostische methoden zijn absoluut betaalbaar en worden zowel voor preventieve als diagnostische doeleinden uitgevoerd.

    De belangrijkste methoden voor de diagnose van tuberculose:

    1. Radiografie van de borstholte;
    2. Huidtuberculinetesten (Mantoux-test, diaskintest);
    3. Microscopisch en bacteriologisch onderzoek van het biomateriaal voor de aanwezigheid van mycobacteriën.

    Er zijn ook meer moderne diagnostische methoden, zoals een bloedtest voor tuberculose. Door een dergelijke studie uit te voeren, kunt u de aanwezigheid van een infectie bevestigen. Vooral belangrijk is een bloedtest voor tuberculose in dergelijke gevallen:

    • Met extrapulmonale tuberculose (in dergelijke gevallen is het onmogelijk de ziekte met röntgenstralen te identificeren);
    • Met twijfelachtige resultaten van tuberculinatie;
    • Wanneer de resultaten van de hoofdstudies negatief zijn, maar de persoon wordt gestoord door symptomen die lijken op tuberculose;
    • Na langdurig contact met een persoon met tuberculose.

    Diagnose van tuberculose in het bloed met behulp van ELISA

    Na het ontmoeten van een persoon met mycobacterium tuberculosis begint het immuunsysteem, net als bij andere micro-organismen, specifieke eiwitsubstanties te produceren - antilichamen die de groei van microben voorkomen.

    Dus, na contact met mycobacteriën, worden specifieke antilichamen van verschillende klassen in het lichaam geproduceerd - Ig A, Ig G, Ig M. Het is Ig M dat voor het eerst in het bloed verschijnt, hun detectie duidt op een acuut infectieproces. Later verschijnen Ig G, maar ze worden levenslang in het bloed bewaard. De detectie van Ig G is een bewijs van het feit dat het lichaam al eens in contact is geweest met een specifiek micro-organisme.

    De methode van enzymimmunoassay (ELISA) is slechts gebaseerd op de bepaling in de bloedbaan van antilichamen tegen Mycobacterium tuberculosis. De op ELISA gebaseerde test omvat de detectie van Ig-klasse antilichamen, evenals totale antilichamen (Ig A + Ig G + Ig M). De gevoeligheid van de test is ongeveer 86%. Vals-positieve resultaten zijn mogelijk in ongeveer 5-10% van de gevallen.

    De studie van veneus bloed voor tuberculose met behulp van ELISA wordt uitgevoerd door particuliere laboratoria. Na het onderzoek worden de resultaten in het formulier ingevoerd. Mogelijke varianten van resultaten zijn:

    • Antilichamen gedetecteerd;
    • Geen antilichamen gedetecteerd;
    • Resultaten zijn onzeker.

    Als antilichamen tegen mycobacteriën van tuberculose werden gedetecteerd, wordt het testresultaat als positief beschouwd. Dit betekent dat de persoon is geïnfecteerd met tuberculose. Het is echter belangrijk om te onthouden dat er vals-positieve resultaten kunnen zijn veroorzaakt door de recente vaccinatie.

    Als het onderzoeksformulier zegt dat er geen antilichamen zijn gevonden, is het testresultaat negatief. Dit wordt waargenomen in gevallen waarin een persoon niet is geïnfecteerd met tuberculose, of er is een infectie in het lichaam, maar de antilichaamtiter is nog steeds te laag.

    Als de testresultaten negatief zijn, maar de persoon symptomen van tuberculose heeft, moet de studie na enkele weken worden herhaald.

    Diagnose van tuberculose in het bloed door PCR

    Een andere moderne methode voor de diagnose van tuberculose is de studie van materiaal met behulp van PCR. Het gebruikte materiaal is niet alleen veneus bloed, maar ook sputum, hersenvocht, urogenitale uitstrijkjes, urine. Het is bekend dat alle bacteriën hun unieke DNA bevatten. De methode van PCR-onderzoek is gebaseerd op de detectie van DNA-fragmenten van Mycobacterium tuberculosis in het testmateriaal.

    PCR-onderzoek wordt beschouwd als een van de meest gevoelige en snelle diagnostische methoden. Aldus duurt bacteriologisch onderzoek van mycobacterium biomateriaal enkele weken, terwijl de resultaten van PCR-onderzoeken op dezelfde dag gereed zullen zijn.

    Na het PCR-onderzoek zal het formulier een van de mogelijke opties aangeven:

    • DNA niet gedetecteerd;
    • DNA wordt gedetecteerd.

    Een negatief resultaat geeft aan dat Mycobacterium tuberculosis niet werd gedetecteerd in bloed of ander materiaal. Dit betekent dat de persoon niet is geïnfecteerd met tuberculose. Een positief resultaat bevestigt de aanwezigheid van mycobacteriën. Meestal wordt een vergelijkbaar resultaat gedetecteerd met actieve tuberculose, wat een intensieve behandeling vereist.

    Zo kan een bloedtest voor tuberculose worden gebruikt als een aanvullende diagnostische methode als u een ziekte vermoedt. Bloedonderzoek met ELISA en PCR kan extrapulmonaire vormen van tuberculose detecteren en de diagnose bevestigen in gevallen waarin de resultaten van standaardstudies twijfelachtig zijn.

    Grigorov Valeria, arts, medische recensent

    1.067 totaal aantal keer bekeken, 2 keer bekeken