Voor- en nadelen van PCR (a) voor de diagnose van tuberculose

Een specifieke tuberculose-infectie is al vele jaren aanwezig in menselijke weefsels en structuren en verspreidt zich onder bepaalde omstandigheden snel door het lichaam in 2-3 maanden. Soms is de beste behandeling moeilijk te kiezen vanwege de late diagnose en aanpassing van de ziekteverwekker aan veel geneesmiddelen.

De nieuwste PCR-diagnose van tuberculose helpt niet alleen de ontwikkelde ziekte te ontdekken, maar ook de ziekteverwekker zelf, wanneer de eerste tekenen van de ziekte nog niet zijn verschenen.

Wat is PCR?

Diagnose van tuberculose door PCR is recentelijk verschenen. In 1983 vond een microbioloog uit Amerika, Cary Mullis, een procedure uit waarmee micro-organismen in korte tijd konden worden gereconstrueerd uit biologisch materiaal. Dit werk heeft de Nobelprijs verdiend.

PCR voor tuberculose is een polymeerketenproces waarbij de diagnose en detectie van virale pathogenen door genetische manipulatie plaatsvindt. De techniek wordt gebruikt in immunologische, microbiologische, virologische en biochemische laboratoria.

De universele methode helpt artsen een diagnose te stellen en identificeert een infectieus proces, zelfs na de eerste uren van infectie, lang voor het begin van de symptomen. Onderzoek is mogelijk, zelfs met een kleine hoeveelheid biomateriaal.

Wat is nodig voor analyse?

• Verschillende segmenten van DNA (primers), waarmee de biologische synthese begint;
• Nucleotide-verbindingen, de basis van het DNA-molecuul of RNA;
• Een polymerase-enzym dat PCR-analyse versnelt.

Wat is de basis van de methode?

Eerst wordt een segment van DNA geëxtraheerd uit een biomateriaal van een geïnfecteerde persoon, met behulp van de gen-moleculaire biosynthesewerkwijzen, het type micro-organismen waartoe het biofragment behoort, wordt verder bepaald.

Deze complexe reactie kost minder tijd dan sommige biomethoden. PCR bepaalt het pathogeen in een paar uur, terwijl het niet nodig is om het te isoleren van een biologisch fluïdum (sputum, cerebrospinaal of bloedmedium), het is niet noodzakelijk om het gedurende een lange tijd op een voedingsmedium te laten groeien. Het is voldoende dat het bestudeerde materiaal een DNA-streng van een infectieus pathogeen bevat.

Bij het uitvoeren van een PCR bloedtest op tuberculose in vitro, wordt de synthese van ribonucleïnezuren van de mycobacterium tuberculosis kunstmatig aangemaakt.

Stadia van diagnose

Moleculaire reactie door PCR is een eenvoudige procedure die weinig tijd kost. Het benodigde biomateriaal wordt genomen: bloed, sputum, bronchiale wasvloeistof worden gebruikt om de tec.

1. Eerst wordt de primaire vorm van DNA vernietigd, twee kettingen worden gescheiden bij hoge temperatuur (maximaal 98 ° C gedurende niet meer dan 2 minuten);
2. Vervolgens wordt uitgloeien uitgevoerd, de primaire temperatuur wordt verminderd door verschillende verdelingen, de DNA-streng wordt gekoppeld aan de primer;
3. Het volgende stadium wordt elongatie genoemd, met de biosynthese van de noodzakelijke moleculaire structuren.

Om het vereiste aantal kopieën van DNA te verkrijgen, moet van 25 tot 30 dergelijke cycli worden doorlopen en het resulterende aantal mycobacteriën wordt gemakkelijk herkend.

Is het nodig om PCR te doen voor tuberculose?

Rechtstreeks voor alle patiënten met een vermoedelijke TVC, worden kettingdiagnoses niet uitgevoerd, omdat de procedure het gebruik van dure apparatuur vereist. Niet alle medische staatsinstellingen staan ​​toe dat het wordt gekocht, vooral omdat de gebruikelijke methoden voor het diagnosticeren van mycobacterium tuberculosis ook informatief zijn.

• Zorgvuldige geschiedenisverhalen, de patiënt in vraag stellen;
• Extern onderzoek;
• Mantoux-tuberculinetest;
• Radiografisch of fluorografisch onderzoek;
• Indien nodig, computerdiagnostiek;
• Microscopisch of bacteriologisch onderzoek van het masker met sputum.

PCR voor tuberculose wordt alleen gedaan wanneer het niet mogelijk is om nog een instrumentele analyse uit te voeren of in omstandigheden die moeilijk te diagnosticeren zijn.

Ondanks het feit dat een groot aantal diagnostische methoden zijn uitgevonden, blijft het aantal patiënten met tuberculose groeien. Bovendien heeft de incidentie enkele kenmerken gekregen: een ernstige vorm van de ziekte wordt vaak waargenomen, het aantal sterfgevallen neemt toe, het pathogeen wordt resistent tegen bestaande chemotherapiedrugs.

Veel mensen willen niet elk jaar een routine-inspectie ondergaan, vaccinatie weigeren, wat leidt tot een toename van de incidentie. Dergelijke omstandigheden vereisen effectieve en informatieve onderzoeksmethoden die beschikbaar zijn voor volwassenen en kinderen met de diagnose tbc. PCR heeft voordelen ten opzichte van andere diagnostische methoden.

Wat is de waarde van de methode?

Dit nieuwste onderzoek heeft zichzelf goed bewezen. Als het om een ​​aantal redenen moeilijk is om een ​​diagnose te stellen of, in sommige controversiële gevallen, detecteert PCR de tuberkelbacillus gemakkelijker in biologisch materiaal dan andere methoden.

• Deze snelle studie, een klein deel van het molecuul, maakt het mogelijk om in een korte tijd een accurate diagnose te stellen in ongeveer 5 uur, dit wordt bijvoorbeeld gebruikt in noodgevallen voor een dringende chirurgische ingreep;
• Een bloedtest voor tuberculose is mogelijk wanneer andere methoden niet beschikbaar zijn of gecontra-indiceerd - soms moet voor de detectie van de tbc-ziekteverwekker veel Rg-shots worden genomen, waarbij de stralingsdosis te groot is;
• Met behulp van de polymerasereactie kunnen biologische vloeistoffen worden onderzocht op de aanwezigheid van mycobacteriën. U kunt bijvoorbeeld een studie van hersenvocht met tuberculeuze meningitis of urine met urogenitale tuberculose doen;
• De methode is veilig, de diagnose van tuberculose bij kinderen met PCR veroorzaakt geen problemen;
• De methode van polymeerreactie onthult een tuberkelbacil in alle vormen en stadia van de ziekte;
• De aanwezigheid van slechts een paar bacteriën in het biomateriaal stelt u in staat om de aanwezigheid van micro-organismen te zien, omdat dit een gevoelige reactie is;
• PCR diagnosticeert gemakkelijk de herhaling van de ziekte.

Ondanks het enorme aantal voordelen, zijn alle patiënten met verdenking op een tbc-studie nog niet klaar, aangezien er ook nadelen zijn, ze worden ook in aanmerking genomen.

video

Video - vroege diagnose

Wat zijn de nadelen?

Deze diagnosemethode is eerder uitzonderlijk dan natuurlijk, hiervoor zijn er redenen. Allereerst wordt rekening gehouden met de hoge kosten van de methode. De apparatuur is duur, openbare klinieken hebben niet de mogelijkheid om het te kopen vanwege de hoge prijs, maar de meeste van de betaalde laboratoria hebben de apparatuur, ze worden geanalyseerd.

• De methode detecteert dode bacteriën die zijn gestorven na behandeling, terwijl PCR een positief resultaat laat zien. Direct na chemotherapie heeft het geen zin om een ​​onderzoek uit te voeren, omdat het resultaat onbetrouwbaar is;
• Mycobacterium tuberculosis-mutaties zijn gevoelig, wat leidt tot inefficiëntie van de methode en de DNA-streng kan niet consistent worden gesynthetiseerd.

De omgeving voor het onderzoek moet zorgvuldig worden geselecteerd, bloed of urine kan alleen worden verzameld als er een vermoeden van infectie bestaat. Sputum mag niet worden gebruikt voor onderzoek als er bottuberculose wordt vermoed. In deze situatie is de diagnose onjuist.

Het bloed en de urine van een patiënt met tuberculose die op PCR moet worden onderzocht, wordt zelden genomen, de identificatie van de ziekte op deze manier is twijfelachtig. In deze biologische media wordt het pathogeen alleen in sepsis of in het geval van gedissemineerde tuberculose bepaald. Lokale vormen komen het meest voor, met hun bloed en urine kunnen ze ongewijzigd blijven. Meestal wordt slijm genomen voor onderzoek.

Wie laat de analyse zien?

De meeste patiënten worden gestuurd voor PCR-diagnose in controversiële en moeilijke gevallen van tuberculose. Wanneer geven medische professionals doorverwijzingen voor onderzoek?

1. Als er contact is met een persoon die op betrouwbare wijze is gediagnosticeerd met tuberculose, maar het is moeilijk om een ​​diagnose te stellen met behulp van conventionele methoden;
2. In die omstandigheden, als de patiënt om de kliniek te bieden onmogelijk is voor radiografie of ander onderzoek. In een dergelijke situatie is het gemakkelijker om het te inspecteren met behulp van de polymeermethode. Sputum-analyse wordt eenvoudig in een speciale container aan het laboratorium afgeleverd en het resultaat wordt na enkele uren bekend;
3. Vóór de operatie is het dringend noodzakelijk om te bepalen of de patiënt ziek is van tuberculose, in welk geval PCR is geïndiceerd;
4. Vanwege de veiligheid van de methode is het mogelijk om een ​​onderzoek van een zwangere vrouw of een kind uit te voeren, zonder een extra röntgenbelasting te creëren;
5. Twijfelachtige Mantoux-testresultaten.

Iedereen die wil kan worden onderzocht voor een vergoeding als tuberculose niet is bevestigd met behulp van bacteriologie en fluoroscopie. Dit gebeurt als de laesie in het longweefsel onzichtbaar is in het Rg-beeld in een directe projectie en de patiënt niet in staat is om sputum correct te verzamelen, maar de tekenen van menselijke tuberculose zijn verstoord.

Moderne PCR-reactie voor diagnose is de sleutel tot een succesvolle behandeling, waardoor de prevalentie van de ziekte afneemt. Traditionele methoden voor het identificeren van kwalen produceren niet altijd het gewenste effect.

Dus PCR-analyse tot nu toe is uitgegroeid tot een van de betrouwbare en veilige methoden voor diagnose in de vroege stadia van de ziekte.

PCR-analyse voor tuberculose

PCR-analyse voor tuberculose is het meest populair bij medisch onderzoek op het gebied van deze ziekte.

Maar hoe kunt u uzelf en uw dierbaren waarschuwen voor deze vreselijke ziekte? Hoe de noodzakelijke tests voor PCR door te geven?

Symptomen van tuberculose en de preventie ervan

Experts zeggen dat ongeveer 30% van de totale bevolking lijdt aan tuberculose.

Het hoogste percentage van de ziekte wordt ontwikkeld in niet-ontwikkelde landen. Dit komt meestal voor als gevolg van verminderde immuniteit bij mensen.

De ziekte is een van de oudste. Deze ziekte kan worden gevonden in de bekleding van de hersenen, in het spijsverteringskanaal, op de gewrichten en de wervelkolom, in het urinewegstelsel en in kleine gebieden op de menselijke huid.

Experts bepalen het gemakkelijkst de aangetaste huid. Op de site zijn er kleine zeehonden, die in de loop van de tijd groter worden, barsten uit met witachtige vloeistof.

De veroorzaker van tuberculose kan meestal worden opgepakt wanneer ze met een zieke persoon praten, wanneer ze hoesten of niezen. Meestal gaat de ziekte voort zonder symptomen of heeft een open vorm, maar PCR-diagnose van tuberculose maakt het mogelijk om het te detecteren in de vroege stadia en in noodgevallen.

Symptomen van de ziekte: langdurige natte hoest, koorts, rillingen, overmatig zweten 's nachts, een sterk gewichtsverlies, gevoel van vermoeidheid en zwakte.

De open vorm van de ziekte is het gevaarlijkst. Een persoon die lijdt aan tuberculose kan gezonde mensen infecteren.

Het belangrijkste symptoom van longziekte is bloedspuwing. Het komt voor in elke vorm van de ziekte.

In sommige situaties kan dit leiden tot bloeden uit de longen van een persoon. Het is erg gevaarlijk en vereist dringend medisch ingrijpen.

Voor de preventie en herkenning van tuberculose schrijven deskundigen voor: een monster - een tuberculinatie, een onderzoek van biologisch materiaal, fluorografie, röntgenfoto's en een bloedtest, sputum of speeksel.

Diagnose van de ziekte

Verbeterde diagnose van de ziekte - dit is de juiste en tijdens de behandeling gestart. In de meeste gevallen hebben de gebruikelijke methoden voor het detecteren van pathogenen niet altijd een effect en zijn ze al verouderd.

De belangrijkste manier om longaandoeningen te identificeren en diagnosticeren, zijn medische onderzoekstests. Gebruik meestal PCR-diagnostiek. Dit onderzoek werd vrij recent ontdekt, in 1983, door de Amerikaanse biochemicus Mullis.

De test bij een patiënt met longtuberculose wordt uitsluitend in speciale gevallen uitgevoerd wanneer het moeilijk is om de diagnose vast te stellen of het onmogelijk is om de ziekte op een instrumentele manier te detecteren.

Polymerase-kettingreactie is een betrouwbare PCR-methode. Deze analyse maakt het mogelijk om de veroorzaker te bepalen hoeveel het is in de bloed-, urine- en ruggenmergvloeistoffen. Zo'n medisch onderzoek is het veiligst.

PCR-analyse geeft 100% resultaat.

Het heeft een hoge gevoeligheid, wat helpt om de ziekte voor het eerst uren na infectie te herkennen, voordat de symptomen van de ziekte verschijnen. Deze analysemethode geeft het resultaat binnen enkele uren na de levering van biologisch materiaal. Het zaaien van deze analyse wordt driemaal uitgevoerd, maar aspiratie van de zieke maag wordt alleen in het ziekenhuis uitgevoerd.

Drie criteria werden ontwikkeld om de resultaten te bepalen: hoge nauwkeurigheid, gevoeligheid tot 90%, specificiteit.

De test voor PCR wordt in sommige gevallen gebruikt:

1. om longtuberculose te diagnosticeren;
2. de bron van de ziekte bepalen;
3. definitie van extrapulmonale lokalisatie;
4. diagnose van recidief.

Evalueer het resultaat en schrijf de juiste medische behandeling voor, kan alleen een specialist. Het is erg belangrijk om het juiste schema van medische behandeling toe te wijzen voor de detectie van tuberculose, het is noodzakelijk om een ​​test uit te voeren voor de gevoeligheid van het pathogeen voor tuberculose-apparaten.

Een verscheidenheid aan tuberculose medische tests

U kunt de noodzakelijke analyse op twee manieren uitvoeren: neem bloed of speeksel van een persoon of neem een ​​sputum.

Bloedonderzoeken met PCR kunnen van twee soorten zijn: ELISA en PCR. Zo'n onderzoek helpt om de effectiviteit van medische behandelingen te bewaken.

Een ELISA helpt bij het vinden van antilichamen in het menselijk lichaam die tuberculose-microben weerstaan. Deze studie wordt één keer per dag uitgevoerd. Het grootste nadeel is de lage gevoeligheid, waardoor het mogelijk is om alleen een ziekte met een laag infectieniveau te bepalen.

Het meest populaire en effectieve onderzoek is de analyse van mycobacterium tuberculosis. Met haar kunnen artsen gemakkelijk het DNA van bacteriën in menselijk bloed vinden. Deze methode wordt ook gebruikt om het aantal bacteriën te bepalen, om de behandeling van de patiënt te regelen, om vroegtijdig recidief te detecteren.

PCR-speeksel is een van de meest geavanceerde onderzoeksmethoden. Een dergelijke analyse helpt infectieuze bacteriën in het speeksel te identificeren. Het gebruik van PCR verhoogt het aantal DNA-fragmenten van schadelijke microben.

De kweekmethode is bedoeld voor het onderzoeken van menselijk sputum, voor de detectie van microbacteriën.

Voorbereiding op PCR-testen

Let op, je hebt de juiste voorbereiding van speeksel nodig voor PCR. Als niet aan alle voorschriften wordt voldaan, kan de analyse vals-positief zijn.

Voordat u de test uitvoert, is het verboden om te roken, voedsel en medicijnen in te nemen en 12 uur lang alcohol te gebruiken. Het is verboden om uw tanden te poetsen, u kunt geen glansmiddel, mondverfrisser en tandzijde gebruiken.

Het is verboden lippenstift te gebruiken en intieme relaties aan te gaan. Laat je mond spoelen met gewoon gekookt water;

Dit onderzoek zal helpen identificeren: herpes, chlamydia, tuberculose, pathogenen van pneumonie, oncovirussen, barolleosis, mononucleosis, HIV, alle soorten hepatitis, rubella.

De analyse voor mycobacteriën wordt voornamelijk uitgevoerd in controversiële gevallen, namelijk als het moeilijk is om een ​​diagnose te stellen of er was contact met een patiënt met tuberculose, voordat de operatie begon, om de ziekte te detecteren. Gebruikt voor onderzoek van een zwangere vrouw, omdat deze methode het veiligst is voor moeder en foetus.

Soms wordt de analyse uitgevoerd in een privékliniek, omdat de patiënt zich niet aan de regels voor het testen hield, maar tegelijkertijd maakt hij zich zorgen over alle symptomen. De analyse kan worden uitgevoerd wanneer specialisten niet zeker zijn na het uitvoeren van een Mantoux-test of als de patiënt een kind is.

Voor- en nadelen van medische tests voor de bepaling van tuberculose

PCR is de meest populaire en effectieve manier om de ziekte te bepalen.

Het grootste verschil met andere onderzoeken is een snel en nauwkeurig resultaat.

Het voordeel van dit medisch onderzoek is dat het kan worden uitgevoerd voor urologische, gynaecologische, oncologische, infectieuze, hematologische, pulmonaire, gastro-enterologische en andere studies.

Het grote voordeel van een dergelijke medische studie is dat bloedtesten, sputum en speeksel in korte tijd klaar zijn (het zal 5 uur duren om de ziekte op te sporen). Een dergelijk medisch onderzoek maakt het mogelijk dat tests worden uitgevoerd wanneer bepaalde methoden voor het bestuderen van een ziekte verboden of ontoegankelijk zijn. Geweldig voor het detecteren van recidief bij mensen.

Dankzij deze analyse werd het mogelijk om onderzoek uit te voeren voor elke biologische omgeving. Het is toegestaan ​​om materiaal van kinderen te nemen. PCR maakt het mogelijk om de veroorzaker te identificeren in elk stadium van de ziekte. Vanwege zijn hoge gevoeligheid kunnen microben worden gevonden, zelfs als er maar een paar bacteriën aanwezig zijn.

De PCR-methode breidt zijn mogelijkheden uit. Het wordt ook gebruikt om het vaderschap vast te stellen, voor de vervaardiging van nieuwe genen, mutaties, voor het kruisen van DNA-elementen, enzovoort.

De nadelen van deze studie zijn een dure enquêtemethode.

Na een medische behandeling kan een bloedtest de aanwezigheid van levende of dode pathogenen in kleine hoeveelheden aantonen, na een medisch onderzoek zal dit een positief resultaat opleveren.

Bacteriën en microben kunnen een mutatie ondergaan, waarna de PCR ze niet kan identificeren en identificeren, daarom kan alleen een specialist een onderzoek naar de vereiste omgeving voorschrijven, anders zal zo'n medisch onderzoek niet effectief zijn.

Na het testen is er een negatief resultaat, maar dit sluit de mogelijkheid niet uit dat iemand besmet raakt met tuberculose. Een dergelijk medisch onderzoek wordt uitgevoerd voor patiënten met ernstige longziekte, wanneer andere onderzoeken geen nauwkeurige resultaten geven. PCR zal nuttig zijn voor mensen met pulmonaire en extrapulmonale tuberculose.

Helaas is medische apparatuur om tuberculosepathogenen te detecteren erg duur.

Openbare ziekenhuizen en klinieken kunnen het niet betalen, maar betaalde klinieken nemen patiënttests en leveren in korte tijd kant-en-klare resultaten.

PCR-diagnose van tuberculose bij kinderen en volwassenen

Moderne diagnostische methoden (pcr, diaskintest, quantiferon-test) zijn zeer effectief, maar in de praktijk zijn de studies niet geverifieerd. Tuberculine diagnose was de basis voor het identificeren van geïnfecteerde en zieke mensen.

De methode liet toe om veel zieke mensen te identificeren, de statistieken van morbiditeit, mortaliteit te verminderen.

Door mycobacteriën en sputummicroscopie te zaaien volgens Zill-Nelson kunt u de infectie betrouwbaar diagnosticeren. Het probleem veroorzaakt het exacte nemen van sputum rechtstreeks van de aangetaste bronchus. Op de achtergrond van het tuberculeuze proces wordt een aanzienlijk deel van de bronchiale boom aangetast. Na bacterieel zaaien, is het mogelijk om een ​​test uit te voeren voor de gevoeligheid van het pathogeen voor het antibioticum.

Na analyse van het resultaat van diagnostiek door fytotherapeuten werd duidelijk dat het ontbreken van uitscheiding van Koch's sticks niet betekent dat er geen infectie in het lichaam is. De veroorzaker kan worden bepaald na het tweede, derde en vierde opnamemateriaal.

Moderne diagnostische methoden (dst, Quantiferon-test) detecteren mycobacteriën met een actief beloop van de ziekte. In aanwezigheid van mycobacteriën in de lymfeklieren, met extrapulmonaire vormen van de ziekte, zijn de testen meestal negatief.

Tijdige diagnose is de basis voor het voorkomen van ernstige complicaties en gevaarlijke gevolgen van de ziekte.

Moderne methoden

De vervanging van klassieke tuberculine-diagnose is diaskintest (dst). Volgens de nieuwste regelgeving zou de studie de standaard Mantoux-test moeten vervangen, die het mogelijk maakte om veel gevallen van morbiditeit en infectie onder de bevolking te identificeren.

De essentie van Diaskintest, evenals tuberculine diagnose, betreft de subcutane toediening van eiwitten van pathogenen van tuberculose. Als reactie op de injectie is een overgevoeligheidsreactie ontwikkeld met specifieke huidveranderingen: roodheid, verharding, blaarvorming.

Een positief resultaat van Diaskintest is typisch voor patiënten met een actief beloop van de ziekte. In geval van infectie of verhoogde allergisatie, zal de studie negatief zijn. Het negatieve effect van dst kan het gevolg zijn van een sterke immuniteit, maar wanneer een persoon is geïnfecteerd.

In vergelijking met Mantu is Diaskintest een meer veelzijdige en gevoelige manier om tuberculose te diagnosticeren. De afwezigheid van detectie van infectie vereist het gebruik ervan gelijktijdig met tuberculine diagnose.

Ondanks de resultaten van klinische proeven dst, debatteren wetenschappers over de algemene universaliteit en gevoeligheid van de methode, de studie kan niet als een universele diagnostische oplossing worden beschouwd.

Een test is ontwikkeld door academici van het Sechenov Research Institute. De afwezigheid van allergieën bij het gebruik van diaskintest wordt verklaard door subcutane toediening van soortspecifieke tuberculose-eiwitten. Na hun introductie wordt bepaald door de huidreactie in de vorm van roodheid, zeehonden.

Wat is quantiferon-test

De kwantiferontest wordt geëvalueerd na het nemen van het bloed van de patiënt. Het mechanisme van de procedure is om het gamma-interferon te bepalen dat wordt vrijgegeven door T-lymfocyten na ontmoeting met mycobacteria tuberculosis. Tests bepalen tuberculaire eiwitten die niet alleen menselijke en runderbacteriën bevatten. De kwantiferondetest kan ook worden gebruikt voor het diagnosticeren van mycobacteriose veroorzaakt door andere mycobacteriën die specifieke veranderingen op de röntgenfoto vormen. Het testresultaat wordt bepaald in verschillende reageerbuizen, waardoor de diagnostische gevoeligheid van de methode toeneemt.

PCR voor de diagnose van kindertuberculose

Polymerase kettingreactie is een nauwkeurige maar dure methode voor het diagnosticeren van tuberculose. PCR wordt uitgevoerd na bronchoscopie.

Het is rationeel om een ​​polymerasekettingreactie uit te voeren na het ontvangen van negatieve resultaten. De resultaten worden beoordeeld na driemaal sputumkweek van Mycobacterium tuberculosis. Onder de meest gunstige omstandigheden duidt de identificatie van het pathogeen op infectie. Het doel van chemoprofylaxe vermijdt het actieve tuberculeuze proces in de aanwezigheid van Koch-sticks.

Bij ontvangst van een stam van een micro-organisme is het mogelijk om op vatbaarheid voor antibiotica te zaaien. Bepaling van antibiotica die micro-organismen kunnen doden, stelt ons in staat om te evalueren welke medicijnen de infectie behandelen.

PCR bij kinderen wordt uitgevoerd met negatieve resultaten van zaaien, maar als er een tuberculinetest plaatsvindt, visualisatie van röntgensignalen van infectie, detectie van klinische symptomen van de huidige infectie.

Polymerase kettingreactie biedt hoge nauwkeurigheid (ongeveer 99%). De methode is gebaseerd op nucleïnezuuramplificatie. Mycobacteriën, virussen en andere micro-organismen hebben unieke nucleotidesequenties. Hun diagnose maakt het mogelijk om de veroorzaker van de ziekte te identificeren.

De gevoeligheid van PCR bij kinderen is minder laag dan bij volwassenen. In de praktijk werden de volgende kenmerken van de polymerasekettingreactie bij een kind onthuld:

1. Specificiteit - 80-100%;
2. Gevoeligheid - 25-80%.

Ondanks de hoge nauwkeurigheid van de methode, betekent het verkrijgen van een negatief resultaat niet de afwezigheid van tuberculose bij kinderen. Een meer rationeel gebruik van de methode bij patiënten met immunodeficiëntie. Bij de diagnose van extrapulmonale tuberculose-infectie.

Interpretatiefouten worden bepaald door overtredingen bij het verzamelen en voorbereiden van materiaal voor het onderzoek.

De redenen voor het negatieve resultaat van PCR bij de diagnose van tuberculose

De verspreiding van mycobacteriën in het lichaam door lymfogene (via lymfevaten) en hematogene (via de bloedbaan) zorgt voor de kolonisatie van veel weefsels, het uiterlijk van extrapulmonaire foci van infectie.

Bij röntgenbepaling van foci van vernietiging (destructie) in de longen is PCR niet nodig. Bij volwassenen, met behulp van radiografie, is het mogelijk om geavanceerde vormen met een hoge mate van vertrouwen te identificeren.

Bij kinderen wordt het PCR-onderzoek vaker gebruikt vanwege de latente lokalisatie van mycobacteriën in de lymfeklieren, wat leidt tot negatieve resultaten bij het gebruik van andere diagnostische methoden. Met bacteriële kweek is het voldoende om ongeveer 10 micro-organismen te detecteren. Men moet niet vergeten dat niet iedereen verantwoordelijk is voor actieve longtuberculose.

Voor de juiste diagnose van PCR, bacterieel zaaien, DST moeten de vereisten worden gevolgd:

1. Bewaar het materiaal in steriele tubes;
2. Elimineer de invoer van andere bacteriën;
3. Houd bij het transport rekening met persoonlijke hygiëne om te voorkomen dat het biomateriaal op het lichaam, het gezicht en de luchtwegen valt.

Opgeslagen bloed samen met conserveermiddel EDTA. Er zijn unieke kenmerken van de voorbereiding van het materiaal voor elke laboratoriumanalyse, waarmee experts vertrouwd zijn.

Innovatieve diagnostische methoden

Vroege detectie van infectie zorgt voor tijdige chemoprofylaxe, om ernstige ziekte te voorkomen.

Wissen van de kliniek in de kindertijd, onvoldoende testresultaten, ongeletterde interpretatie van de evaluatie van monsters maakt een tijdige verificatie van de infectie niet mogelijk. Om kinderziekte te voorkomen, is een zorgvuldige analyse van de resultaten vereist, met de mogelijkheid om in een vroeg stadium een ​​diagnose te stellen.

Moderne methode voor laboratoriumdiagnostiek van tuberculose bij kinderen - detectie van TAB-TM

De reactie op de bepaling van de T-celmarker bij kinderen met de naam "TAB-TM" wordt gekenmerkt door een hoge gevoeligheid. De essentie van de methode bestaat uit de identificatie van een bepaald cluster van differentiatie (CD-27) gelokaliseerd op het oppervlak van T-lymfocyten. Na het isoleren van deze factor worden cytokinen gekleurd met cytometrie.

De methode is sinds 2014 in de literatuur beschreven. De resultaten van observaties wijzen op een hoge gevoeligheid van de methode. De bepaling van TAB-TM is een uitdrukkelijke methode voor het diagnosticeren van tuberculose door sputumonderzoek.

Een bloedtest voor tuberculose - waaruit blijkt

In het beginstadium vindt tuberculose-infectie plaats zonder specifieke klinische symptomen. Laboratoriumdiagnose bij kinderen wordt mogelijk wanneer de Koch-staaf zich vermenigvuldigt.

Welke cellen worden geëvalueerd in het tuberculeuze proces in een laboratoriumbloedonderzoek:

1. Rode bloedcellen zijn rode bloedcellen die verantwoordelijk zijn voor het transport van zuurstof naar de weefsels. Met een licht verloop van longtuberculose vanaf de zijkant van de rode spruit van bloed, zijn er geen pathologische veranderingen. De aanwezigheid van een destructieve focus draagt ​​bij aan bloedingen met bloedarmoede. De aandoening ontwikkelt zich met tuberculeuze ontsteking van de darmwand. Het aantal reticulocyten op de achtergrond van de pathologie neemt toe met meer dan 1%;
2. Leukocyten nemen toe met elke infectie. Leukocytose gaat gepaard met een verschuiving van het leukogram naar links. De toename van het aantal gesegmenteerde neutrofielen kan worden opgespoord in de beginfase. Bij ernstige tuberculose met purulente fusie, immuundeficiënties, wordt leukopenie waargenomen (een afname van het aantal bloedleukocyten). Tegelijkertijd verhoogt het gehalte aan lymfocyten (meer dan 20%);
3. Eosinofilie kan worden teruggevoerd naar de beginfase. De aandoening treedt op wanneer tuberculeuze infiltraten van verschillende organen. Ernstige tuberculose met verval bij volwassenen leidt tot de volledige afwezigheid van eosinofielen;
4. Basophil-verbetering.

Laboratoriumtests voor tuberculose zijn niet specifiek voor kinderen of volwassenen. Dergelijke veranderingen zijn kenmerkend voor vele bacteriële of virale infecties.

Hemogramindicatoren zijn interessant voor tuberculose-specialisten om het stadium van tuberculose-infectie te bepalen.

Met actieve infiltratie kan leukocytose worden opgespoord als gevolg van een toename van het aantal neutrofielen. Pathologisch grit verschijnt in de cellen, wat duidt op bloedvergiftiging.

De centra van desintegratie leiden tot een afname van het aantal eosinofielen, neutrofielen, jonge vormen, lymfocyten. Wanneer disseminatie plaatsvindt, treedt absolute monocytose op. Op de achtergrond van resorptie neemt het aantal lymfocyten en eosinofielen toe.

Bij consolidatie van de centra wordt het hemogram niet gekenmerkt door veranderingen.

Kindtests voor tuberculose: diagnose van tuberculine

Voor een lange tijd, phthisiatricians geënsceneerd Mantoux reactie. Dergelijke tests voor tuberculose maakten het mogelijk niet alleen actieve infectie, maar ook infectie te detecteren. De essentie van het monster was de subcutane injectie van tuberculine - een stof die de allergie van het lichaam veroorzaakte. Het deeg gebruikt materiaal verkregen van Micobacterium Bovis. Na een subcutane injectie wordt een papule verkregen, die de reactie van het lichaam op de penetratie van mycobacteriën weerspiegelt:

1. Normale papel - grootte van 5 tot 16 mm;
2. Bij afwezigheid van een reactie - verzwakking van het immuunsysteem, de afwezigheid van mycobacteriën;
3. Grote papel - de aanwezigheid van bacteriële antigenen, in contact met een drager van tuberkelbacillen.

De methode wordt niet als betrouwbaar beschouwd vanwege het grote aantal fout-positieve reacties. Wanneer twijfelachtige resultaten vereiste bevestigings-PCR. Met de komst van diaskintest (dst) is de situatie veranderd. Het gecombineerde gebruik van methoden maakt het mogelijk om betrouwbaardere resultaten te verkrijgen.

Klassieke "phthisiologische" methoden voor de diagnose van tuberculose

Phthisiatricians voor de diagnose van tuberculose bij kinderen en volwassenen gebruiken de volgende tests:

• Studie van de geschiedenis van de patiënt (contact met de patiënt of de drager van de tuberkelbacillus). Het identificeren van sociale risicofactoren helpt mogelijke infecties te suggereren;
• Beoordeling van tuberculine-gevoeligheid (Mantoux-test) met PPD-tuberculine in een dosis van 5-10 TE. Evaluatie van het resultaat wordt uitgevoerd in 48-72 uur;
• Röntgenonderzoek wordt uitgevoerd bij kinderen en volwassenen met verdenking op tuberculose, een buiging van tuberculinatie;
• Bacteriologische cultuur is onweerlegbaar bewijs van infectie veroorzaakt door Mycobacterium tuberculosis. Met de juiste sputumcollectie, detectie van de ziekteverwekker in de maagwassingen, kunnen tests voor tuberculose als positief worden beschouwd. Koch's staf wordt gevonden in etterende abcessen, lymfeklieren, ascitische effusie, pleuraal exsudaat, urine, hersenvocht;
• De bezinkingssnelheid van erytrocyten neemt toe met elke infectie, inclusief tuberculose;
• Met PCR kun je een specifieke ziekteverwekker identificeren, maar de studie is duur;
• Diaskintest bepaalt longtuberculose, maar geeft vaak negatieve resultaten bij extrapulmonale lokalisatie van de infectie.

Moderne diagnostiek van tuberculose met behulp van een complex van methoden maakt het mogelijk mycobacterium in het lichaam te bepalen met een hoge mate van betrouwbaarheid. Met behulp van bestaande methoden wordt een actief proces of een infectie gedetecteerd. We hebben alleen tijd nodig om contact op te nemen met de experts!

PCR-diagnose van tuberculose

Tuberculose is een specifieke infectie, de focus ervan kan jarenlang in menselijke weefsels liggen en vervolgens gedurende enkele maanden worden verspreid. Dit is een chronische ziekte waarvan de optimale behandelingsregimes moeilijk te selecteren zijn. Een van de redenen hiervoor is de late diagnose, wanneer mycobacteriën, terwijl ze zich in het menselijk lichaam bevinden, al aan veel medicijnen zijn aangepast.

Welke moderne diagnosemethoden bestaan ​​er? PCR-diagnose - wat is het? Hoe wordt dit onderzoek gedaan? In welke gevallen wordt met deze methode tuberculose gediagnosticeerd en wat is de essentie ervan?

Wat is PCR-diagnostiek

Dit is een van de modernste methoden om niet alleen ziekten te diagnosticeren, maar ook om biologisch materiaal te detecteren. PCR-diagnostiek is relatief recent uitgevonden. Ongeveer 30 jaar geleden, in 1983, stelde een Amerikaanse biochemicus, Carey Banks Mullis, een complex herstelplan voor het biologische materiaal van micro-organismen voor in een kort segment. Dankzij zijn ontdekking kreeg de wetenschapper de hoogste onderscheiding - de Nobelprijs.

Wat is het - PCR-diagnose van infecties? Polymerase-kettingreactie (PCR) is een diagnose van de detectie van virale ziekten, gebaseerd op werkwijzen van genetische manipulatie. Het wordt veel gebruikt in de medische microbiologie, immunologie en virologie. De methode is universeel en helpt om een ​​diagnose te stellen met een kleine hoeveelheid materiaal. Een infectie kan letterlijk worden gedetecteerd in de eerste uren van infectie ermee, lang voordat de eerste symptomen van de ziekte verschijnen.

De methode bestaat erin om uit het materiaal van een zieke persoon niet de ziekteverwekker zelf te halen, maar fragmenten van het genoom (DNA-deeltjes), de biosynthese ervan met daaropvolgende bepaling tot welke klasse van micro-organismen het verkregen genetische materiaal behoort door middel van moleculair genetische methoden.

Ondanks het feit dat dit een complex proces is, kost het veel minder tijd dan veel biologische methoden voor het detecteren van infectieuze agentia. Binnen slechts een paar uur kan een micro-organisme worden gedetecteerd met behulp van PCR. Om dit te doen, is het niet nodig om het te isoleren van de omgeving (bloed, hersenvocht, sputum) en het te laten groeien op kunstmatige voedingsmedia. Het is voldoende dat een klein fragment van de DNA-streng van het infectieuze agens aanwezig is in het materiaal dat wordt bestudeerd.

De basis van de reactie is de mogelijkheid onder kunstmatige omstandigheden (in vitro) om de synthese van nucleïnezuurmoleculen van het infectieuze agens te creëren.

Wat is nodig voor PCR?

1. Primers zijn de DNA-segmenten waaruit biosynthese of creatie begint.
2. Nucleotiden of complexe verbindingen die de basis vormen van een DNA- of RNA-molecuul.
3. Polymerase kettingreactie is onmogelijk zonder de aanwezigheid van polymerase, wat een enzym is dat de PCR versnelt.

Stadia van PCR-diagnostiek

Hoe wordt moleculaire diagnose uitgevoerd door PCR? De procedure is eenvoudig en neemt een korte tijd in beslag, rekening houdend met de verzameling van materiaal.

1. Voordat ze met het onderzoek beginnen, nemen ze het nodige biologische materiaal in - dit is het bronchiale waswater, bloed, maaginhoud, sputum. Het type biologisch materiaal hangt af van het vermoedelijke pathogeen.
2. Denaturatie of vernietiging van de primaire structuur van DNA, dat uit twee ketens bestaat. De essentie van deze fase is om de twee ketens te scheiden onder invloed van hoge temperaturen (het maximum is 98 ºC, dat niet langer duurt dan twee minuten).
3. In het volgende stadium van PCR, genaamd uitgloeien, wordt de temperatuur met verschillende graden verlaagd, zodat de primer aan de DNA-streng zal binden.
4. Verlenging, waarbij de synthese van de gewenste moleculen direct plaatsvindt.

Als resultaat ontvangen slechts 25-30 van dergelijke cycli het noodzakelijke aantal kopieën van het DNA van het micro-organisme, die gemakkelijk te herkennen zijn.

Vereist PCR een diagnose van tuberculose?

Het is niet mogelijk voor absoluut alle mensen met vermoedelijke tuberculose om PCR uit te voeren, omdat de methode dure apparatuur vereist. Niet alle openbare klinieken kunnen het zich veroorloven om het te kopen. Bovendien was het zo dat de gebruikelijke methoden om een ​​infectie te diagnosticeren in de meeste gevallen ook zichzelf rechtvaardigen.

Deze omvatten:

• patiëntonderzoek, geschiedenis nemen;
• volledig onderzoek van de persoon;
• een studie met de tuberculinetest van Mantoux;
• radiografie of fluorografie;
• computer diagnostiek indien nodig;
• microbiologische onderzoeksmethoden: uitstrijk microscopie en sputum bacteriologisch onderzoek.

PCR voor tuberculose wordt in speciale gevallen uitgevoerd wanneer het moeilijk is om een ​​diagnose te stellen of het niet mogelijk is om andere instrumentele methoden uit te voeren.

Ondanks de overvloed aan diagnostische methoden, blijft de incidentie van tuberculose toenemen. Momenteel is er niet alleen de groei, maar ook andere kenmerken:

• de ziekte komt vaak in ernstige vorm voor;
• het aantal dodelijke gevallen neemt toe;
• steeds resistenter tegen moderne chemotherapie zijn gediagnostiseerde vormen van de ziekte.

De terughoudendheid van de mensen zelf om jaarlijks routine-medische onderzoeken te ondergaan, de afwijzing van vaccinatie leidt tot de verspreiding van tuberculose. In dergelijke omstandigheden hebben we snelle, informatieve en effectieve onderzoeksmethoden nodig die toegankelijk moeten zijn voor kinderen en volwassenen. Alle bovenstaande diagnostische methoden zijn veel slechter dan PCR.

Voordelen van het diagnosticeren van tuberculose met PCR

Dit onderzoek, hoewel nieuw, heeft zichzelf goed bewezen, vooral in controversiële gevallen waarin het onmogelijk is om een ​​diagnose te stellen om een ​​aantal redenen.

Dankzij PCR is het veel gemakkelijker om de veroorzaker van tuberculose in het testmateriaal te detecteren.

De voordelen van PCR-diagnose zijn als volgt.

1. Dit is een snelle analyse. Een klein fragment van het DNA-molecuul kan worden gebruikt om binnen enkele uren (ongeveer vijf) een diagnose te stellen, die met succes wordt gebruikt in noodsituaties, wanneer bijvoorbeeld vóór een operatie moet worden vastgesteld of iemand ziek is van tuberculose.
2. PCR-analyse is toegestaan ​​in het geval dat andere methoden niet beschikbaar of verboden zijn (voor de detectie van longtuberculose, moet u soms meerdere radiografische beelden maken, wat een grote dosis straling zal zijn).
3. Met behulp van PCR wordt elke biologische omgeving onderzocht op de aanwezigheid van een pathogeen daarin. U kunt bijvoorbeeld een studie van hersenvocht uitvoeren, als er een vermoeden bestaat van tuberculeuze meningitis.
4. Toegestane PCR-diagnose van infectieziekten bij kinderen, omdat de methode veilig is.
5. Hiermee kunt u de ziekteverwekker in elk stadium van de ziekte identificeren.
6. De hoge gevoeligheid van PCR maakt het mogelijk om Mycobacterium tuberculosis te detecteren, zelfs als er slechts een paar micro-organismen in het biologische materiaal aanwezig zijn.
7. Het is goed om uit te voeren voor de diagnose van ziekte-recidief.

Immers de lees-PCR lijkt een bijna perfecte diagnostische methode, die iedereen met verdenking van tuberculose zou moeten maken. Maar er zijn ook nadelen, ze moeten in aanmerking worden genomen.

Nadelen van PCR bij de diagnose van tuberculose

In onze tijd zijn dergelijke diagnoses zeldzamer dan regelmaat. En daarvoor is er reden.

1. Dit is een dure onderzoeksmethode. In veel klinieken is apparatuur voor PCR afwezig vanwege de hoge kosten, maar analyse kan nog steeds worden uitgevoerd in betaalde laboratoria.
2. Direct na de behandeling kunnen dode mycobacteriën of in kleine hoeveelheden leven nog aanwezig zijn in het menselijk lichaam (het resultaat zal positief zijn tijdens PCR-diagnostiek), dus de methode zal op dit moment onbetrouwbaar zijn, het heeft geen zin om het uit te voeren.
3. Mutaties van mycobacteriën resulteren in niet-effectieve PCR - een normale DNA-strengsequentie kan niet worden gesynthetiseerd.
4. Het is noodzakelijk om de juiste omgeving voor de studie te kiezen, bloed wordt alleen ingenomen als het wordt vermoed besmet te zijn (sepsis), het is niet nodig om sputum te nemen als er sprake is van tuberculose van de organen van het zenuwstelsel. In dit geval kan de PCR het pathogeen niet detecteren en is de diagnose niet informatief.

Indicaties voor het detecteren van tuberculose met behulp van PCR-analyse

PCR-diagnose van tuberculose wordt het vaakst uitgevoerd in controversiële gevallen. Wanneer verwijzen artsen naar deze studie?

1. Als het moeilijk is om een ​​diagnose te stellen met behulp van de gebruikelijke beschikbare methoden, maar er was contact met een patiënt met tuberculose.
2. In het geval dat een persoon niet aan een kliniek kan worden afgeleverd om routinematige routinetests voor tuberculose te ondergaan, is het gemakkelijker om hem met PCR te onderzoeken, omdat het sputum voor de test in een pot kan worden afgeleverd en de diagnose binnen een paar uur wordt bevestigd.
3. Als een persoon een spoedoperatie gaat krijgen en het is dringend nodig om uit te zoeken of hij ziek is van tuberculose.
4. Indien nodig, is een zwangere vrouw ook beter om te onderzoeken op tuberculose met behulp van PCR, omdat de methode veilig is.
5. Op betaalde basis is iedereen die niet is gediagnosticeerd met tuberculose bevestigd met bacteriologische methoden en fluoroscopie. Dit gebeurt wanneer de laesie in de longen onmerkbaar is in het directe beeld en de persoon tijdens de bevalling van sputum voor het onderzoek de aanbevelingen voor de juiste verzameling van materiaal niet kon volgen. In dit geval maakt de persoon zich zorgen over alle symptomen die kenmerkend zijn voor longtuberculose.
6. Als er twijfels zijn over de resultaten van de Mantoux-test.
7. Het verdient de voorkeur een PCR-diagnose van tuberculose bij kinderen te doen. De procedure is veilig, creëert geen extra blootstelling aan straling en is effectief bij het opsporen van moeilijk te diagnosticeren vormen van de ziekte.

Tijdige diagnose van tuberculose is de sleutel tot een goed voorgeschreven behandeling en het verminderen van de verspreiding van de ziekte. Vaak zijn bekende ziektedetectiemethoden niet altijd effectief. Daarom is PCR vandaag de dag een van de meest betrouwbare en veilige manieren om infectie te detecteren in de vroege stadia van zijn ontwikkeling.

PCR-analyse (diagnose) van tuberculose

Tuberculose of consumptie - een van de meest populaire infectieziekten van de 21e eeuw. Zijn pathogenen zijn speciale microbacteriën - Koch-sticks.

De ziekte wordt niet alleen naar de longen verspreid, maar ook naar de hersenen, de spijsvertering, de gewrichten of de wervelkolom, het urinewegstelsel en de huid.

Volgens de WHO lijden jaarlijks 10 miljoen mensen aan tuberculose, waarvan 3 miljoen dodelijk zijn.

De situatie is vooral triest op het grondgebied van de GOS-landen, hier komen periodiek tuberculeuze epidemieën voor. Rusland, Kazachstan, Oekraïne wordt geleid door een trieste beoordeling van de verspreiding van deze infectie.

De infectie wordt gemakkelijk overgedragen door druppeltjes in de lucht of door het spijsverteringsstelsel, beïnvloedt vitale organen en is ook in staat zich snel aan te passen aan polymere geneesmiddelen en chemotherapie.

Een van de belangrijkste factoren voor een succesvolle behandeling van tuberculose is de tijdige detectie van infecties.

Diagnostische methoden

De mens heeft veel methoden uitgevonden voor het herkennen van een gevaarlijke ziekte. Diagnose van tuberculose is onderverdeeld in instrumentaal en laboratorium.

In het eerste geval, een bloedtest voor tuberculose, evenals sputum, urine.

De tweede groep is een onderzoek met röntgen en endoscopie. Instrumentele methoden voor het diagnosticeren van tuberculose zijn op hun beurt bestraling en chirurgie.

Soorten stralingsmethoden voor het vinden van de ziekte

• Fluorografie is een methode voor het diagnosticeren van een ziekte die bij elke inwoner van het GOS bekend is. Met behulp van röntgenfoto's worden de longen en hilarische lymfeklieren onderzocht.
• X-thorax - vergelijkbaar met fluorografie, maar een betere methode om infecties te detecteren. De foto wordt in meer detail en in twee projecties verkregen, maar deze procedure is ongeveer zes keer duurder. Meestal wordt het gebruikt nadat ernstige vermoedens van de ziekte zijn ontstaan.
• Computertomografie wordt uitgevoerd als een aanvullende diagnose, ook gebruikt na een goede reden voor de aanwezigheid van een infectie.

Chirurgische methoden voor diagnose omvatten bronchiale endoscopie, evenals mediastinoscopie en thoracoscopie.

De eerste methode is om de bronchiale boom van de longen te bestuderen met behulp van een "sonde" in dit orgaan. De resterende twee methoden maken het mogelijk om het pleurale deel van de long te bestuderen door een punctie van de borstkas.

Alle drie de methoden zijn een ernstige chirurgische interventie en worden het vaakst gebruikt in het proces van ziekteprogressie.

Laboratoriumtests omvatten:

• Sputum-analyse voor tuberkelbacillus.
• Microscopisch onderzoek.
• PCR-diagnose van tuberculose

Wat is PCR-diagnose?

Een van de meest geavanceerde methoden voor laboratoriumdiagnose van infecties specialisten noemen polymerase kettingreactie.

Deze methode werd ontwikkeld door de beroemde Amerikaanse wetenschapper Carrie Mullis in 1983, waarvoor hij de Nobelprijs won.

PCR-analyse is de isolatie van DNA-deeltjes uit sputum, bloed, hersenvocht, uitwerpselen, enz. voor hun daaropvolgende biosynthese.

Met behulp van een complexe moleculair genetische studie, wordt de aard van de microben in het lichaam van de patiënt bepaald.

Dit soort analyse voor tuberculose wordt in verschillende fasen uitgevoerd:

• Eerst worden biologische monsters genomen. Materialen worden in speciale containers geplaatst en naar het laboratorium gestuurd.
• In het onderzoekscentrum worden de analyses tot 97 graden verwarmd. Dit maakt het mogelijk om de structuur van het genoom van het DNA van micro-organismen, dat uit meerdere ketens bestaat, te vernietigen.
• De temperatuur wordt specifiek verlaagd, zodat de primers (DNA-deelnemers waarvan het biosyntheseproces begint) verbinding kunnen maken met elke deoxyribonucleïnezuurketen.
• Daarna wordt de biosynthese van moleculen die nodig zijn voor detectie uitgevoerd.

Na 25-30 herhaalde cycli in het laboratoriumonderzoeksproces, hebben artsen de mogelijkheid om te herkennen of infectieuze micro-organismen aanwezig zijn in het lichaam van de patiënt of niet.

Voor- en nadelen

PCR voor tuberculose is de meest moderne diagnostische techniek. De methode maakt het mogelijk de infectie in elk stadium met hoge betrouwbaarheid te detecteren. voordelen:

• Snelheid - de studie duurt niet meer dan vijf uur. De resultaten van de test voor tuberculose-microben zijn binnen 24 uur te vinden.
• Veiligheid - PCR-methode kent geen contra-indicaties voor de leeftijd.
• Tijdigheid - met deze techniek kunt u tuberculose detecteren in die stadia waarin de ziekte geen symptomen heeft.
• Hoge nauwkeurigheid - als er slechts een paar micro-organismen in de analyses zitten, zullen ze worden gevonden met behulp van een polymerasekettingreactie. Ook maakt deze techniek het mogelijk om gemakkelijk de veroorzaker van tuberculose te identificeren.
• Veelzijdigheid - diagnostiek wordt niet alleen gebruikt voor de detectie van consumptie, maar ook voor andere ziekten zoals chlamydia, gonorroe, enz.

Ondanks de vele voordelen, is het gebruik van deze techniek in de huisartsenpraktijk eerder uitzondering dan regel. Daar zijn een aantal redenen voor.

De nadelen van deze methode zijn:

• De hoge kosten van de enquête.
• De methode is niet geschikt voor mensen die een therapie hebben ondergaan, omdat de aanwezigheid van dode Koch-bacteriën tot een vals-positief resultaat kan leiden.
• In het geval van mutatie van infectieuze micro-organismen kan hun genoom niet worden herkend door een verkeerde conclusie te trekken.
• Het is belangrijk om de juiste detectieomgeving te kiezen. Het resultaat van een bloedtest op PCR voor tuberculose (verdunning) zal bijvoorbeeld negatief zijn als het zenuwstelsel is geïnfecteerd.
• Het is niet altijd mogelijk om deze methode toe te passen op patiënten met longletsels.

Bovendien vereist een dergelijke analyse voor tuberculose moderne apparatuur die 90 procent van de ziekenhuizen niet heeft. In de CIS kan een dergelijke analyse worden uitgevoerd door het netwerk van Invitro-klinieken.

Voorwaarden van analyse

Aanbevelingen voor patiënten die een dergelijke test voor tuberculose ondergaan, zijn afhankelijk van het type analyse dat ze doormaken.

Bij het nemen van bloed voor PCR, is het noodzakelijk om te stoppen met roken een uur voor de procedure, gedurende twee uur - om alcohol en vet voedsel uit te sluiten.

Het wordt ook aanbevolen om af te zien van fysieke inspanning, het is ook onmogelijk om bloed te nemen voor tuberculose op een lege maag.

Wanneer u een wattenstaafje uit de mond en neusholte neemt, kunt u 2-4 uur voor de ingreep niet eten, anders is het geen informatief. Drink ook geen alcohol.

Voor nauwkeurige metingen is het verboden om eerder dan een uur voor de procedure te roken. Aan de vooravond, afzien van het tandenpoetsen en het gebruik van sprays en mondsprays.

Als u tuberculose van het urogenitale systeem vermoedt, moet de patiënt 2-3 dagen vóór de bevalling geslacht uitsluiten, 2-3 uur voor de ingreep niet "op een kleine manier" naar het toilet gaan. Geslachtsorganen moeten zonder speciaal water worden gewassen met gewoon water.

Vrouwen wordt geadviseerd om geen vaginale tabletten, kaarsen, ballen te gebruiken en ook om niet te testen op kritieke dagen.

5 dagen voorafgaand aan de bevalling, is het resultaat noodzakelijk om de procedure van colposcopie en transvaginale echografie op te geven,

Wanneer wordt PCR-diagnostiek gebruikt?

Niet elke kliniek heeft zo'n complexe diagnose, maar artsen gaan steeds meer over tot dergelijke onderzoeksmethoden. Meestal wordt dit soort analyse uitgevoerd in speciale situaties.

• Bij twijfelachtige resultaten van manta kan een bloedtest voor tuberculose worden gebruikt.
• In gevallen waarin de patiënt in contact is geweest met een geïnfecteerde persoon, maar de behandelend arts kan de diagnose niet nauwkeurig vaststellen.
• In geval van een spoedoperatie, wanneer het nodig is om in een korte tijd uit te zoeken of de patiënt deze infectie heeft.
• Wanneer een patiënt zwanger is, wanneer andere onderzoeksmethoden niet veilig genoeg zijn voor een pasgeboren baby.

Opgemerkt moet worden dat deze diagnose wordt aanbevolen voor kinderen vanwege de veiligheid ervan.

Als een student contra-indicaties tegen een tuberculinatie-test heeft, kan hij een bloedtest voor tuberculose in plaats van mantel met behulp van PCR.

Wat is de PCR-analyse voor tuberculose

Een innovatieve methode voor de detectie van micro-organismen, bedacht door de wetenschapper Cary Mullis aan het eind van de vorige eeuw - PCR-analyse. Hij ontving voor zijn geschriften de Nobelprijs. Volledig dit proces wordt polymerasekettingreactie genoemd. Het bestaat uit het herstel van het type micro-organisme in het geleverde biomateriaal met behulp van korte DNA-fragmenten. Hiermee kunt u infecties in een vroeg stadium opsporen en onmiddellijk met de behandeling beginnen, zonder dat dit leidt tot ernstige symptomen en complicaties.

Wat is de analyse

Diagnose door PCR is om segmenten van pathogeen DNA uit biologisch materiaal te verkrijgen en ze in de juiste keten uit te lijnen. Dit maakt de identificatie mogelijk van het micro-organisme waartoe de cellen behoren.

De procedure wordt uitgevoerd in drie fasen:

1. Verzameling van biologisch materiaal.
2. Identificatie en uitlijning van DNA.
3. Erkenning van infectie.

Deze studie vereist speciale medische apparatuur - amplificerend. Het is uitgerust met een camera, waar het bestudeerde materiaal interageert met hoge temperatuur en chemische enzymen. Bij de uitgang heeft de laborant een lange DNA-keten van het veroorzakende agens, als er een in het menselijk lichaam is.

Hoe zich voor te bereiden op de diagnose

PCR-analyse is een complex genetisch engineeringproces dat nauwkeurigheid en ernst vereist van zowel laboratoriumtechnici als patiënten. Een grote rol in de juistheid van de analyseresultaten wordt gespeeld door de voorbereiding op de procedure, dat wil zeggen, de juiste verzameling van materiaal.

De belangrijkste bronnen van informatie over de ziekte zijn:

Andere opties kunnen worden gebruikt, vloeistoffen worden, indien nodig, genomen voor analyse vanuit verschillende organen.

Voor de patiënt zijn er bepaalde regels die vóór de procedure moeten worden gevolgd. Als er een bloedtest is, is het verboden om dit 8 uur vóór de inname te doen:

• eet voedsel;
• roken;
• alcoholische dranken drinken;
• neem medicatie mee naar binnen.

'S Avonds, voor het verzamelen van sputum, is het medicijn dronken om het te verdunnen en het slijm te vergemakkelijken. Verzamel het materiaal 's morgens na een grondige hygiëne van de mondholte.

Urine wordt 's morgens op een lege maag, na het wassen, in een steriele pot verzameld voordat medicatie wordt ingenomen.

Als een persoon antibiotica gebruikt, moet de analyse van de polymerasekettingreactie worden uitgesteld, anders is het PCR-resultaat niet betrouwbaar. Sputum of bloed moet twee weken na afloop van de behandeling worden gedoneerd.

Hoe verloopt het proces van het identificeren van bacteriën

In het kort gezegd, het proces is om een ​​deel van het DNA te isoleren. Het gebruik van moderne methoden van genetische manipulatie stelt ons in staat om het type micro-organisme te bepalen. Bovendien heeft het materiaal voor de analyse een kleine hoeveelheid nodig.

Technisch gezien is dit een zeer ingewikkelde procedure, maar het kost minder tijd dan klassieke bacteriologische onderzoeken. Ziekteverwekkers hoeven niet te worden geïsoleerd van het biomateriaal, het is niet nodig om ze enkele weken te laten groeien. Op de dag van aflevering kan de patiënt het resultaat van zijn analyse al kennen.

Het hele proces van PCR verloopt in fasen:

1. Er wordt gewerkt aan de primaire vorm van DNA, die bij hoge temperatuur, dicht bij 100 graden, is verdeeld in twee ketens.
2. De temperatuur neemt af, de draden zijn verbonden met de nucleïnezuurfragmenten - de primer.
3. Elongatie treedt op - synthese van moleculaire structuur.

De hele sessie bestaat uit ongeveer dertig van dergelijke procedures, waarbij een cyclus wordt herhaald als een kettingreactie. Dit is nodig om het aantal cellen te creëren waarin de resulterende bacteriën herkenbaar worden.

Conclusie van de studie

Beschrijving van het resultaat van PCR (polymerase kettingreactie) geeft een tbc-arts, het is eenvoudig of ingezet. In het eerste geval zal de beschrijving alleen informatie bevatten over de aanwezigheid of afwezigheid van Koch-sticks. Als de decodering gedetailleerd is, kun je daaruit de omvang van de ziekte, de focus ervan, achterhalen. Volgens deze criteria is het mogelijk om in elk afzonderlijk geval de meest geschikte behandeling voor tuberculose te bepalen.

De polymerase-analyse van de kettingreactie maakt geen onderscheid tussen levende en dode pathogenen en spreekt alleen van hun aanwezigheid. Daarom is het zinvol om pas na 3-4 weken na de door de arts voorgeschreven therapie een tweede test voor tuberculose te geven.

Als het resultaat positief is, wordt de inscriptie "Mycobacterium tuberculosis" geconcludeerd. Als er een negatief resultaat is, is er naast de biologische naam van de bacterie een teken "niet gedetecteerd". Analyses kunnen vals-positief zijn. Dit gebeurt zelden - in geval van schending van de techniek van het uitvoeren van PCR-studies of in de aanwezigheid van niet-levensvatbare micro-organismen. De uiteindelijke conclusie over de ziekte kan alleen worden gemaakt door een tbc-arts.

Voordelen van de methode

PCR-diagnostiek van tuberculose is om vele redenen populair geworden. Het heeft veel voordelen, waaronder:

1. Nauwkeurigheid van onderzoek. Bij het analyseren van technologie is het mogelijk om bacteriën te identificeren, zelfs als ze in kleine hoeveelheden aanwezig zijn.
2. Snel resultaat Het hele proces van het verzamelen van het materiaal tot het voltooien van de conclusie duurt ongeveer 5 uur. In vergelijking met zaaien, moet het tot enkele weken wachten.
3. Volledige veiligheid voor de persoon, in tegenstelling tot fluorografie met zijn straling.
4. Elk vloeibaar biomateriaal wordt gebruikt. Voor de implementatie van PCR in pulmonale tuberculose geeft sputum de meest nauwkeurige informatie: bij tuberculeuze meningitis wordt een monster uit het ruggenmerg genomen. Een bloedtest helpt om lokale foci van infectie te identificeren.
5. De gevoeligheid van bacteriën voor antibiotica wordt getest. Hiermee kunt u de juiste behandeling voorschrijven.
6. Vroege diagnose. U kunt leren over de aanwezigheid van de ziekte vóór het optreden van de symptomen.

Naast de positieve aspecten zijn er ook nadelen. De belangrijkste is de prijs. Analyse van PCR is niet goedkoop, wat geassocieerd is met het gebruik van dure apparatuur. Een ander nadeel is de noodzaak om te wachten op de tijd voor een nieuwe test na een behandeling voor tuberculose. Soms is het testresultaat vals-positief. Dit gebeurt als gevolg van bacteriële mutatie.

Wanneer PCR nodig is

PCR voor longtuberculose heeft geen contra-indicaties en is absoluut veilig. Daarom zijn er bepaalde situaties en ziekten wanneer dit de enige mogelijkheid van onderzoek is.

Deze omvatten:

• zwangerschap;
• contact met een tuberculeuze patiënt;
• moeilijkheden bij het bepalen van de diagnose van longziekte;
• onderzoek voor de operatie;
• allergische reactie;
• HIV-infectie;
• jonge leeftijd.

U kunt de PCR-methode gebruiken in de richting die wordt gegeven in de phthisiology, evenals een kinderarts, arts of longarts.

Wat kan de PCR-diagnose van tuberculose vervangen?

Andere soorten enquêtes zijn niet verouderd, maar worden nog steeds gebruikt. Ze worden gebruikt in gevallen waarin het niet mogelijk is om PCR voor tuberculose uit te voeren. Bovendien is de moderne methode niet ideaal, soms worden de indicatoren in twijfel getrokken en moeten ze opnieuw worden gecontroleerd.

De volgende methoden helpen bij het bepalen van de aanwezigheid van tuberculose bij een persoon:

• tuberculine diagnose (Mantoux);
• röntgenfoto van de borstkas;
• testen van biologisch materiaal voor flora;
• röntgenfoto van de longen.

Deze onderzoeken zijn gratis en voor iedereen beschikbaar. Maar ze hebben hun nadelen:

• De tuberculose-test veroorzaakt allergieën. Gecontra-indiceerd bij huidziekten.
• Röntgenonderzoeken gaan gepaard met straling, die niet van toepassing is op kinderen, mensen met immunodeficiëntie en zwangere vrouwen.
• Bacteriologische analyses nemen veel meer tijd in beslag, het resultaat kan tot een maand worden gewacht.

Alternatieven zijn geen garantie voor honderd procent juiste conclusie. Ze worden meestal gebruikt voor preventieve doeleinden. Diagnose van tuberculose door PCR geeft de meest betrouwbare informatie. Als het mogelijk is, is het beter om het te gebruiken.

Eigenaardigheden van tuberculose bij kinderen en de behoefte aan PCR

Het kind moet vooral worden beschermd tegen de ziekte - tuberculose-infectie kan ernstige schade aan het lichaam veroorzaken met een nog niet volledig gevormde immuniteit.

Na het betreden van Koch's toverstok in het kinderorganisme, doorloopt de ontwikkeling van de ziekte de volgende stadia:

• Latent. Het duurt maximaal een jaar, zonder symptomen te geven.
• Intoxicatie. Beïnvloedt de algehele gezondheid. Verschijnt zwakheid, apathie, gebrek aan eetlust, slaperigheid en verminderde prestaties. Constant iets verhoogde temperatuur.
• De primaire vorm van de ziekte. Tuberculose is gelokaliseerd en vormt de focus van de ziekte. Het kind hoest, heeft kortademigheid, hoofdpijn, gezwollen lymfeklieren.
• Tuberculaire bronchoadenitis. Symptomen zijn pijn in de schouderbladen, hoesten met verschillende toonhoogten, piepende ademhaling.

Meestal wordt tuberculine geïnjecteerd om de infectie onder de huid van een kind te identificeren. Als dit type onderzoek gecontra-indiceerd is, dan is PCR voor tuberculose een onmisbare optie voor diagnose. Kinderen nemen meestal een bloedtest, maar sputum wordt indien nodig verzameld. Bij het geringste vermoeden van de aanwezigheid van tuberculose, worden aanvullende onderzoeken uitgevoerd om een ​​positief resultaat te garanderen en onmiddellijk met de behandeling te beginnen in een vroeg stadium, waarbij de ontwikkeling van de ziekte wordt voorkomen.

Moderne onderzoeksmethoden zijn altijd sneller en betrouwbaarder. Het is jammer dat vanwege de dure apparatuur om dergelijke tests uit te voeren er een mogelijkheid is niet in alle medische instellingen en plaatsen. Hoe het onderzoek wordt uitgevoerd, wordt meestal door de arts gekozen, maar de patiënt heeft het recht om te kiezen. Als je een PCR-test moest doen, vertel het ons dan in de comments. Als het artikel nuttig voor u was, deel het dan op sociale netwerken - misschien helpt het uw vrienden.